中文名稱：細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit
產(chǎn)品規(guī)格：50T
發(fā)貨周期：～3天
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒采用了經(jīng)典的碘化丙啶染色(Propidium staining，即PI staining)方法進(jìn)行細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡的分析。
碘化丙啶 (Propidium，PI) 是一種雙鏈DNA熒光染料，其嵌入雙鏈DNA后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA被PI染色后，可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定，根據(jù)DNA含量的分布情況，進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡分析。
PI染色后，假設(shè)G0/G期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為-2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化 (DNA fragmentation) 導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過(guò)程中丟失，因此凋亡細(xì)胞PI染色后呈現(xiàn)明顯的弱染，即熒光強(qiáng)度小于，在流式檢測(cè)的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G峰，即凋亡細(xì)胞峰。
細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來(lái)檢測(cè)。 細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。凋亡前期，染色質(zhì)皺縮，細(xì)胞密度增加，前向角光散射色顯著降低。凋亡后期，細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體，前向角光散射和側(cè)向角光散色都顯著降低。
本試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)。如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)，則必須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài)，才可以進(jìn)行檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件：-20℃，避光

注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
PCF Diluent （0X） （0 ml）     PCF Diluent （0X）
ZIETDFMK， Caspase8抑制劑（氟）     Caspase8 Inhibitor ZIETDFMK
Bisindolylmaleimide V （ mg）     3，4diHindol3ylmethylHpyrrole2，5dione； Ro 30|BIM V； Bisindolylmaleimide V
Captopril （25 g）     SA 333|SQ ,225； [（2S）3mercapto2methyloxopropyl]Lproline
Minocycline （hydrochloride） （50 mg）     （4S，aS）4，7bis（dimethylamino），4，4aS，5，5aR，6，，aoctahydro3，0，，atetrahydroxy，dioxo2naphthacenecarboxamide， monohydrochloride； NSC ； Minocycline （hydrochloride）
DmyoInositol,3,4,5,6pentaphosphate ammonium salt) (5 mg)     Ins(,3,4,5,6)P5|,3,4,5,6IP5 (sodium salt), DmyoInositol,3,4,5,6pentaphosphate ammonium salt), Dmyoinositol,3,4,5,6penta(hydrogen phosphate), decaammonium salt
葡聚糖T500500u保存：20℃
525PSS辛基本基取代物Octapxenylsilsesquioxane
豬血清(無(wú)菌)shēng huà shì jì容量：RT25克
噠螨靈 Pyridaben 97 250MG 通用試劑
L炳安醋 Lclcninq;(S)2cMinopropionic ccid;L2cMinopropionic ccid 264
HPheOMeoHClL本基酸鹽酸鹽0克特，98.0%
70異丁酰錄;錄化異丁酰Isobutyryl chloride;Isobutyroyl chloride��
etxyl 2amino4(4chloropxenyl)3thiopxenecarboxylate 2
3酸 3Bromopropionic Acid Methyl Ester,98% 333 25ML 通用試劑
司盤(pán)/司班/山油酸山梨醇酯/失水山梨醇油酸三酯/司本/山梨糖醇酐三油酸酯/清涼茶醇三油酸酯/Span  CP 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒 ，英文名： LPS ELISA Kit
小鼠α酸性糖蛋白(α-AGP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseα-Acidglycoprotein,α-AGPELISAKit 96T/48T
人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)免疫試劑盒 Human MIF ELISA Kit
Ratadrenomedullin,ADMELISAKit大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒0/20次
Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素2(IL-2/P70)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2/P70 ELISA Kit
魚(yú)類三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測(cè)試劑盒Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T
人,3-二0酸甘油酸(,3-DPG)免疫試劑盒 Human ,3-Disphosphoglycerate,,3-DPG ELISA Kit
英文名稱MouseCCL22ELISAKit小鼠CCL22規(guī)格：96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒50次
RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

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