以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說明:
細(xì)胞活力快速檢測試劑盒(Luminescent)本試劑盒是通過對ATP 進(jìn)行定量測定來檢測培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目的一種均質(zhì)檢測方法。ATP 是活細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)指標(biāo)。細(xì)胞活力快速檢測試劑盒為多孔板而設(shè)計(jì),是進(jìn)行自動(dòng)化高通量篩選(HTS)、細(xì)胞增殖和毒性分析的理想選擇。均質(zhì)檢測步驟就是將單一試劑直接加入含有血清的培養(yǎng)細(xì)胞中,無需洗滌細(xì)胞、去除培養(yǎng)基或進(jìn)行多步加樣操作。在384 孔板上,加入試劑并混合后,0 分鐘內(nèi),該系統(tǒng)可檢測到的每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞數(shù)最低為5 個(gè)。
均質(zhì)檢測的" 加樣-混合-檢測" 的操作方案使得細(xì)胞裂解和產(chǎn)生的發(fā)光信號與存在ATP 量成正比,而ATP 量直接與培養(yǎng)物中的細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞活力快速檢測試劑盒產(chǎn)生一種"輝光型" 的發(fā)光信號,半衰期一般大于5 小時(shí),因細(xì)胞類型和培養(yǎng)基而異。由于信號半衰期長,不需要使用試劑自動(dòng)進(jìn)樣器,就可靈活地進(jìn)行連續(xù)的或批量的多孔板處理。獨(dú)特的均質(zhì)檢測方案避免了那些需要多個(gè)步驟的ATP 檢測方法可能會(huì)引入的誤差。
注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測。可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好?朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費(fèi)用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
Phosphate Buffer (00 dtn) Phosphate Buffer
thioβDGlucose (sodium salt) (250 mg) Click Tag
5FAM疊氮化物 5FAM Azide
UNC063 (25 mg) N[(cyclohexylmethyl)4piperidinyl]2[hexahydro4(methylethyl)H,4diazepinyl]6methoxy7[3(piperidinyl)propoxy] 4quinazolinamine
Docosatetraenoyl Ethanolamide (25 mg) N(2hydroxyethyl)7Z,0Z,Z,Zdocosatetraenamide; DEA; Docosatetraenoyl Ethanolamide
4(4Benzofurazanyl),4dihydro2,6dimethyl3,5pyridinedicarboxylic acid, methyl, methylester diester Neurodazine
TRYPTOnepROTH,POWDER胰蛋白胨肉湯生物技術(shù)級顆粒粉末RT不sigma
;,4二羥基丁烷9,4putene7iol;,4Dixy7noxybutane;Tetrametxylene glycol
Thymolphthalein百里香酚酞50kuBR,80%
3MqTHOXYMqTHYLDOPc
SudanⅢ三號25克BR,98%
BRIJ98BRIJ 98 試劑級00G90082RT
48紅色化(劇毒)MERCURY(II) IODIDE
Deoxycholicacidwo7iumsalt去氧膽酸鈉公斤AR,98.5%
4甲基七葉亭 4Methylesculetin,98% 529840 5G 通用試劑
錄化筒箭讀減(劇讀)(+4℃) DTUBOCURcRINq CHLORIDq 2
小鼠脂素(LPIN)ELISA試劑盒 ,英文名: LPIN ELISA Kit
犬2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA檢測試劑盒Canine2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 96T/48T
犬固酮(ALD)免疫試劑盒 Canine aldosterone,ALD ELISA Kit
英文名稱HumanInhibinAELISAKit人抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T
化RNA樣品儲(chǔ)存液50毫升
RatHexokinase,HKELISA試劑盒大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素(IL-)ELISA試劑盒 ,英文名: IL- ELISA Kit
大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA檢測試劑盒RatErythropoietieceptor,EPORELISAKit 96T/48T
人S00鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S00A8/A9)免疫試劑盒 Human S00 calcium-binding protein A8/A9 complex,S00A8/A9 Elisa kit
英文名稱MouseBrainderivedneuroophicfacorELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)規(guī)格:96T/48T
ZENKER固著液50毫升
rabbitProstaglandinE,PGEELISA試劑盒兔子前列腺素E(PGE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞活力快速檢測試劑盒(Luminescent)操作步驟:
、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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