中文名稱：Caspase 6分光光度法檢測試劑盒
英文名稱：Caspase-6 Colorimetric Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|00T
發(fā)貨周期：～3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織caspase-6 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用。Caspase-6 是級聯(lián)酶的下游分子，被Caspase-9 激活后，激活下游Larmin A 的活性，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)發(fā)生皺縮及細(xì)胞膜滲漏。Caspase-6 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段時則被激活。Caspase-6 分光光度法檢測試劑盒就是將caspase-6 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)，當(dāng)該底物被caspase-6 剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來，可通過酶標(biāo)儀或分光光度計（λ=405nm 或400nm）測定其吸光值，可考察caspase-6 的活化程度。
注意事項
. Caspase-6 Substrate 避光保存及使用。
2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-6 活化的機(jī)制，這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-6 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×06 個或新鮮組織50~00mg，以便能達(dá)到測定需要的00~200μg 蛋白的要求，因為Caspase-6 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測定的OD 值偏低，可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。


Caspase 6分光光度法檢測試劑盒注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
Potassium Chloride Stock Solution （ M） （00 mL）     Potassium Chloride Stock Solution （ M）
LArachidonoylcarnitine （chloride） （0 mg）     （R）3carboxy2（（5Z,8Z,Z,Z）icosa5,8,,tetraenoyloxy）N,N,Ntrimethylpropanaminium, monochloride
deoxymethylene Prostaglandin D2 （00 mg）     9。alpha。，Sdihydroxymethyleneprosta5Z，Edienoic acid； deoxymethylene PGD2； deoxymethylene Prostaglandin D2
Cholesteryl Linoleate Hydroperoxides （00 ug）     （±）9hydroperoxy0E，Zoctadecadienoic acid， cholesteryl ester； （±）hydroperoxy9Z，Eoctade； Cholesteryl Linoleate Hydroperoxides
AM azepane isomer （ mg）     （3，5，7）adamantanyl（（methylazepan3yl）Hindol3yl）methanone； AM azepane isomer
Histone H4 Peptide， tetraacetylated， biotin conjugate     Histone H4 Peptide， tetraacetylated， biotin conjugate
貝爾德帕克瓊脂00毫升
3023(2乙基)丙基甲基二甲氧基烷3(2Aminoetxylamino)propyldimetxoxymetxylsilane
固紅GG鹽shēng huà shì jì容量：克
2’,3’,4’三氧基本同 2,3,4Trixy7noxybqnzophqnonq 37
十八醇shēng huà shì jì容量：克
DL異亮酸00克
(+)α酚;(+)5,7,8基母育酚;維生素E(+)αTocopherol;VitaMin E;RRRαTocopherol��
TRISTAPSEDTA(TTE)BUFFER,0XTTE緩沖液,DNA測序用超級5LRT
仲丁基 secButyllithium solution 59830 00ML 通用試劑
,8二氮雜二環(huán)[5.4... ,8Diazabicyclo[5.4.0]undec7ene,98% 622 25G 通用試劑
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