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| 銷售商： 上海莼試生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
中文名稱：Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)
英文名稱：Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|00T
發(fā)貨周期：～3天
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中Caspase-8 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-8 由兩個大亞基和兩個小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-8 熒光檢測試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-8 剪切后，發(fā)色基團即游離出來，可通過熒光酶標(biāo)儀測定其熒光強度（激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm）。
注意事項
. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機制，這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達到3~5×06 個或新鮮組織50~00mg，以便能達到測定需要的00~200μg 蛋白的要求，因為Caspase-8 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測定的RFU 值偏低，可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時間，如果值還是不高，可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Potassium Chloride Stock Solution （ M） （250 mL） Potassium Chloride Stock Solution （ M）
LArachidonoylcarnitine （chloride） （25 mg） （R）3carboxy2（（5Z,8Z,Z,Z）icosa5,8,,tetraenoyloxy）N,N,Ntrimethylpropanaminium, monochloride
deoxymethylene Prostaglandin D2 （5 mg） 9。alpha。，Sdihydroxymethyleneprosta5Z，Edienoic acid； deoxymethylene PGD2； deoxymethylene Prostaglandin D2
Cholesteryl Linoleate Hydroperoxides （500 ug） （±）9hydroperoxy0E，Zoctadecadienoic acid， cholesteryl ester； （±）hydroperoxy9Z，Eoctade； Cholesteryl Linoleate Hydroperoxides
AM azepane isomer （0 mg） （3，5，7）adamantanyl（（methylazepan3yl）Hindol3yl）methanone； AM azepane isomer
Histone H4 Peptide， tetraacetylated， biotin conjugate Histone H4 Peptide， tetraacetylated， biotin conjugate
多聚賴酸shēng huà shì jì容量：RT0克
60243N[3(2基乙基基)丙基]氧基烷N[3(Trimetxoxysilyl)propyl]etxylenediamine
錄化鈷25克
2,3,4,6四O�；�βD葡萄糖基異流青醋酯 2,3,4,6TqTRcOcCqTYLBqTcDGLUCOPYRcNOSYL ISOTHIOCYcNcTq 9
扶鋁酸鈉克2～8℃
DL異檸檬酸鈉，英文名或英文縮寫：DLIsocitric acid triwo7ium salt，級別：BR，%，規(guī)格：00克
酮 SFSilicone SF
神經(jīng)酸苷酶，英文名或英文縮寫：Neuneminidase，級別：BR，90u/mg，芬末，規(guī)格：25克
甲環(huán)酸 Tranexamic acid,97% 5G 標(biāo)準(zhǔn)品
拂米龍醋醋酯 FluoroMqtholonq ccqtctq 07
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒 ，英文名： MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測試劑盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T
人抗SSA/Ro抗體 免疫試劑盒 Human ai-SSA/Ro aibody ELISA Kit
Rat5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit大鼠5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒0/20次
Hydroxycoicosteroids,7-OHCSELISA試劑盒雞7羥皮質(zhì)類固醇(7-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-TG ELISA Kit
大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA檢測試劑盒RatSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit 96T/48T
人p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒 Human Substance P,SP ELISA Kit
英文名稱MouseFollistatinELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)規(guī)格：96T/48T
白細(xì)胞裂解液0毫升
rabbitSolubleprotein-00,S-00ELISA試劑盒兔子S00蛋白(S-00)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)本操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
英文名稱：Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|00T
發(fā)貨周期：～3天
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中Caspase-8 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-8 由兩個大亞基和兩個小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-8 熒光檢測試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-8 剪切后，發(fā)色基團即游離出來，可通過熒光酶標(biāo)儀測定其熒光強度（激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm）。
注意事項
. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機制，這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達到3~5×06 個或新鮮組織50~00mg，以便能達到測定需要的00~200μg 蛋白的要求，因為Caspase-8 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測定的RFU 值偏低，可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時間，如果值還是不高，可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Potassium Chloride Stock Solution （ M） （250 mL） Potassium Chloride Stock Solution （ M）
LArachidonoylcarnitine （chloride） （25 mg） （R）3carboxy2（（5Z,8Z,Z,Z）icosa5,8,,tetraenoyloxy）N,N,Ntrimethylpropanaminium, monochloride
deoxymethylene Prostaglandin D2 （5 mg） 9。alpha。，Sdihydroxymethyleneprosta5Z，Edienoic acid； deoxymethylene PGD2； deoxymethylene Prostaglandin D2
Cholesteryl Linoleate Hydroperoxides （500 ug） （±）9hydroperoxy0E，Zoctadecadienoic acid， cholesteryl ester； （±）hydroperoxy9Z，Eoctade； Cholesteryl Linoleate Hydroperoxides
AM azepane isomer （0 mg） （3，5，7）adamantanyl（（methylazepan3yl）Hindol3yl）methanone； AM azepane isomer
Histone H4 Peptide， tetraacetylated， biotin conjugate Histone H4 Peptide， tetraacetylated， biotin conjugate
多聚賴酸shēng huà shì jì容量：RT0克
60243N[3(2基乙基基)丙基]氧基烷N[3(Trimetxoxysilyl)propyl]etxylenediamine
錄化鈷25克
2,3,4,6四O�；�βD葡萄糖基異流青醋酯 2,3,4,6TqTRcOcCqTYLBqTcDGLUCOPYRcNOSYL ISOTHIOCYcNcTq 9
扶鋁酸鈉克2～8℃
DL異檸檬酸鈉，英文名或英文縮寫：DLIsocitric acid triwo7ium salt，級別：BR，%，規(guī)格：00克
酮 SFSilicone SF
神經(jīng)酸苷酶，英文名或英文縮寫：Neuneminidase，級別：BR，90u/mg，芬末，規(guī)格：25克
甲環(huán)酸 Tranexamic acid,97% 5G 標(biāo)準(zhǔn)品
拂米龍醋醋酯 FluoroMqtholonq ccqtctq 07
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒 ，英文名： MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測試劑盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T
人抗SSA/Ro抗體 免疫試劑盒 Human ai-SSA/Ro aibody ELISA Kit
Rat5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit大鼠5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒0/20次
Hydroxycoicosteroids,7-OHCSELISA試劑盒雞7羥皮質(zhì)類固醇(7-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-TG ELISA Kit
大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA檢測試劑盒RatSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit 96T/48T
人p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒 Human Substance P,SP ELISA Kit
英文名稱MouseFollistatinELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)規(guī)格：96T/48T
白細(xì)胞裂解液0毫升
rabbitSolubleprotein-00,S-00ELISA試劑盒兔子S00蛋白(S-00)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)本操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
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