中文名稱：Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱：Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格：0T|20T|50T|00T
發(fā)貨周期：～3天
Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素APC 標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一種核酸染料，它不能通過正常質(zhì)膜，隨著細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡過程，質(zhì)膜對7-AAD 的通透性逐漸增加，結(jié)合細(xì)胞凋亡中DNA 的有控降解，在合適波長激發(fā)光的激發(fā)下可發(fā)出明亮的紅色熒光，通過7-AAD 標(biāo)記DNA 的強(qiáng)弱，將細(xì)胞分為三群：7-AAD 強(qiáng)為死亡細(xì)胞，7-AAD 弱是凋亡細(xì)胞，7-AAD-為正常活力細(xì)胞。7-AAD 同PI 有著相似的熒光特性，但其發(fā)射波譜較PI 窄，對其他檢測通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI 的最佳替代品，可與Annexin V- APC 聯(lián)合使用。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測（不推薦用于檢測組織樣本）。

注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Potassium Phosphate Stock Solution （500 mM， pH 8。0） （ L）     Potassium Phosphate Stock Solution （500 mM， pH 8。0）
L5,04 （50 mg）     2[4[3（4acetyl3hydroxy2propylphenoxy）propoxy]phenoxy]acetic acid
Mubritinib （00 mg）     [4[4[[2[（E）2[4（trifluoromethyl）phenyl]ethenyl]4oxazolyl]methoxy]phenyl]butyl]H，2，3triazole； TAK 5； Mubritinib
（±）9HODE （00 ug）     （±）9hydroxy0E，Zoctadecadienoic acid； （±）9HODE
Dynasore （25 mg）     3hydroxy2[（3，4dihydroxyphenyl）methylene]hydrazide2naphthalenecarboxylic acid； Dynasore
Biotinylated Bovine Serum Albumin （BiotinLCBSA） （3 biotin/BSA）     Biotinylated Bovine Serum Albumin （BiotinLCBSA） （3 biotin/BSA）
遠(yuǎn)藤氏瓊脂培養(yǎng)基250克RT
6022嘧啶2Bromopyrimidine
磺胺嘧啶鈉shēng huà shì jì容量：00克
2.3二安基97% 2,3DIcMINOncphclqnq
蘇丹Ⅳshēng huà shì jì容量：250毫克
DL乳酸shēng huà shì jì容量：00克
Erythromycin 5g/25g原裝/00g原裝 INALCO5828
扶化釹25克RT
錄安T;錄亞明 T;錄安基本砜內(nèi);N錄4本磺酰安內(nèi)鹽 ChlorcMinq T;ChlorcMinq T trihydrctq;wo7ium p�瞭oluqnqsulfonchlorcMidq;NChloro4toluqnqsulfoncMidq wo7ium sclt;N�睠hloroptoluqnqsulfoncMido wo7ium;Chlorczqnq;Chlorczonq;TolcMinq 7080204
�；敲撗跄懰徕c Sodium Taurodeoxycholate (≥%,TLC) 209 G 通用試劑
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員(PV)ELISA試劑盒 ，英文名： PV ELISA Kit
犬血栓素B2(TXB2)ELISA檢測試劑盒CanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T
犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒 Canine Cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit
英文名稱HumanHistoneDeacetylaseELISAKit人組織蛋白去乙�；�酶(HD)規(guī)格：96T/48T
超聲化鮭魚精單鏈DNA0毫升
RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 ，英文名： β-EPR ELISA Kit
大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA檢測試劑盒RatOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 96T/48T
人PC4,SFRS互動蛋白(PSIP)免疫試劑盒 Human PSIP ELISA kit
英文名稱MousesVCAM-ELISAKit小鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子(sVCAM-)規(guī)格：96T/48T
胞核微型RNA(Pre-RNA)超濾法分離試劑盒0次
rabbitTestoterone,TELISA試劑盒兔子睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

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