Annexin V-APC細胞凋亡檢測試劑盒在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。將Annexin V 進行熒光素APC 標記,以標記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發(fā)生。\
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細胞凋亡檢測(不推薦用于檢測組織樣本)。
以下是細胞生物學試劑詳細說明:
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點:
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 8。0) (250 mL) Potassium Phosphate Stock Solution (500 mM, pH 8。0)
PRIMAMET ( mg) APR 2; 2(hydroxymethyl)2(methoxymethyl)azabicyclo[2.2.2]octan3one
Mubritinib (5 mg) [4[4[[2[(E)2[4(trifluoromethyl)phenyl]ethenyl]4oxazolyl]methoxy]phenyl]butyl]H,2,3triazole; TAK 5; Mubritinib
(±)9HODE (500 ug) (±)9hydroxy0E,Zoctadecadienoic acid; (±)9HODE
Dynasore (5 mg) 3hydroxy2[(3,4dihydroxyphenyl)
Annexin V-APC細胞凋亡檢測試劑盒methylene]hydrazide2naphthalenecarboxylic acid; Dynasore
Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) (3 biotin/BSA) Biotinylated Bovine Serum Albumin (BiotinLCBSA) (3 biotin/BSA)
改良嶙酸鹽緩沖液shēng huà shì jì容量:RT0克
082芴2Bromofluorene
對胺00克
2,3二錄本加醋 2,3Dichlorobqnzoic ccid 203
癸酸500毫克
DL乳酸鈉5克2~8℃
(多聚蛋白胨)
二乙基乙酰與米酸酯,英文名或英文縮寫:Dietxyl acetamidomalonate,級別:BR,99%,規(guī)格:5毫克
2,2二羌基二流代6,6聯(lián) 6xy7noXY2NcPHTHYL DISULFIDq 6088
聚醇縮,英文名或英文縮寫:PVF,級別:AR,99%,規(guī)格:5克
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(PV2)ELISA試劑盒 ,英文名: PV2 ELISA Kit
犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T
犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒 Canine cardiac isoform of opnin T,c ELISA Kit
英文名稱HumanmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit人組織相容性復合物(MHC)規(guī)格:96T/48T
超強免疫化學封閉溶液0毫升
RatGlycatedhemoglobinAc,AcELISA試劑盒大鼠糖化血紅蛋白Ac(Ac)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒
HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanc-fosELISA試劑盒人c-fosELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量檢測試劑盒20次
Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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