呼吸道合胞病毒A 型(RSV-A)核酸試劑盒技術(shù)概論:
聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn);能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:
呼吸道合胞病毒A 型(RSV-A)核酸試劑盒
產(chǎn)品編號(hào):CP94247
產(chǎn)品類別:熒光-PCR法
產(chǎn)品規(guī)格:48T/盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品。
呼吸道合胞病毒A 型(RSV-A)核酸試劑盒【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【使用方法】:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液9μl、RT-PCR酶 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
0×擴(kuò)增緩沖液 0ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各0~00pmol
模板DNA 0.~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ .5mmol/L
加雙或三蒸水至 00ul
PCR反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(00µg/mL,,基體:%HNO3) Lead standard 質(zhì)量規(guī)格:00µg/mL,,基體:%HNO3 牛瘦素(LEP)試劑盒 Bovine Leptin,LEP ELISA Kit
镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml in 0%HCl) Lutetium standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml in 0%HCl 牛雙氫睪酮(DHT)試劑盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml) Molybdenum standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml 牛羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Bovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(00µg/mL,基體: %HCl) Molybdenum standard 質(zhì)量規(guī)格:00µg/mL,基體: %HCl 牛胎盤生長(zhǎng)因子(PGF)試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit
水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-.0(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品) Nickel standard 質(zhì)量規(guī)格:濃度范圍:0.959-.0(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit
鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml) Niobium standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml 牛甜菜堿-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶(BHMT)試劑盒 Bovine Betaine--homocysteine S-methylansferase ,BHMT ELISA kit
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(00μg/mL,基體:%HNO3) Nickel Standard 質(zhì)量規(guī)格:00μg/mL,基體:%HNO3 牛銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineCeruloplasmin,CPELISAKit 96T/48T
鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Potassium standard 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水 牛銅藍(lán)蛋白(CP)試劑盒 Bovine Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(000µg/mL,基體:%HCl) Potassium Solution 質(zhì)量規(guī)格:000µg/mL,基體:%HCl 牛銅鋅-過氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)試劑盒 Bovine Cu/Zn-Superoxide Dismase,Cu/Zn-SOD ELISA Kit
鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml) Praseodymium standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml 牛褪黑素(MT)試劑盒 Bovine melatonin,MT ELISA Kit
牛生長(zhǎng)抑素(SS)試劑盒 Bovine Somatostatin,SS ELISA Kit 銦標(biāo)準(zhǔn)溶液(00mg/L(20℃),基體:%HCl) Indium standard 質(zhì)量規(guī)格:00mg/L(20℃),基體:%HCl
牛瘦素(LEP)試劑盒 Bovine Leptin,LEP ELISA Kit 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(00µg/mL,,基體:%HNO3) Lead standard 質(zhì)量規(guī)格:00µg/mL,,基體:%HNO3
牛雙氫睪酮(DHT)試劑盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml in 0%HCl) Lutetium standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml in 0%HCl
牛羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Bovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit 鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml) Molybdenum standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml
牛胎盤生長(zhǎng)因子(PGF)試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit 鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(00µg/mL,基體: %HCl) Molybdenum standard 質(zhì)量規(guī)格:00µg/mL,基體: %HCl
牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit 水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-.0(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品) Nickel standard 質(zhì)量規(guī)格:濃度范圍:0.959-.0(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品
呼吸道合胞病毒A 型(RSV-A)核酸試劑盒牛甜菜堿-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶(BHMT)試劑盒 Bovine Betaine--homocysteine S-methylansferase ,BHMT ELISA kit 鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(000μg/ml) Niobium standard 質(zhì)量規(guī)格:000μg/ml
牛銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineCeruloplasmin,CP 96T/48T 鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(00μg/mL,基體:%HNO3) Nickel Standard 質(zhì)量規(guī)格:00μg/mL,基體:%HNO3
牛銅藍(lán)蛋白(CP)試劑盒 Bovine Ceruloplasmin,CP ELISA Kit 鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Potassium standard 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水
牛銅鋅-過氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)試劑盒 Bovine Cu/Zn-Superoxide Dismase,Cu/Zn-SOD ELISA Kit 鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(000µg/mL,基體:%HCl) Potassium Solution 質(zhì)量規(guī)格:000µg/mL,基體:%HCl
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(-4)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseNeuroophin4,-4ELISAKIT 96T/48T PS48 PS 48 質(zhì)量規(guī)格:>99%,PDK activator
人谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)試劑盒 human glamic acid decarboxylase aoaibody IgG,GAD-Ab-IgG ELISA Kit 硫鋅酸 Alphalipoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Ratglucocoicoidreceptor,GRELISAKit大鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫辛酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Alphalipoic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
AP標(biāo)記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液0毫升 鹽酸氨索 Ambroxol HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸氨索(標(biāo)準(zhǔn)品) Ambroxol HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 氨磷。ㄈ Amifostine 質(zhì)量規(guī)格:干品Purity≥98.0%
Rat oponin I (Tn- I) ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 桿菌肽 Bacitracin 質(zhì)量規(guī)格:>65IU/MG,BR
HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 鹽酸阿米替林 Amitriptyline HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP3
DeerSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苯磺酸氨氯地平(絡(luò)活喜、安洛地) Amlodipine Besylate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP 6.4,BR
載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒0/20 苯磺酸氨氯地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Amlodipine Besylate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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