單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)彈”
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
小鼠抗RNF149單克隆抗體進(jìn)口單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個B淋巴細(xì)胞(不能在體外生長)。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
多抗和單抗特性比較:
(1)均一性。一種單抗中,每個抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。
(2)穩(wěn)定性。單抗對PH變化敏感,對熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好。
(3)特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)時,特異性強,敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應(yīng)。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合,所以特異性較差,較易引起交叉反應(yīng)。
(4)重復(fù)性。單抗的重復(fù)性好,而多抗每批都不一樣。
(5)沉淀反應(yīng)。多抗由于與抗原多價結(jié)合容易形成網(wǎng)絡(luò)樣沉淀,而單抗只與抗原結(jié)合產(chǎn)生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物。NP Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸鉀(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium stearate
人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-21酸鉀一水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium tartrate, hydrate
大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96 橫紋肌瘤細(xì)胞,A-673細(xì)胞 SNL細(xì)胞,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細(xì)胞株亞碲酸鉀(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium tellurite
lovo, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Human四草酸鉀二水(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPotassium tetraoxalate dehydrate
CD34 Others Mouse 小鼠 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 骨抑制素,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BROsteostatin (human)
MHCC-97L人肝癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS聚乙二醇8000250克RT
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白姆沙伯 P NAW ChroMosorb P NcW;
人結(jié)膜纖維原細(xì)胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動脈平滑肌細(xì)胞 Human聚乙二醇 3000 Poly(ethylene glycol) 3,000 (PEG 3000) 25322-68-3 250G 通用試劑
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30M-FC瓊脂25毫升
ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (D-果糖-6-1酸二鈉)
BMP5 Others Human 人 BMP-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-(N-嗎啉)磺酸鈉,英文名或英文縮寫:MOPS wo7ium salt,級別:BR,99%,規(guī)格:5克
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB三拂磺醋銅 COPPqR(II) TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 34946-8-
CD3D Others Human 人 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) NZ-AMINEA酶水解酪素細(xì)菌學(xué)級粉末COLD不sigma
C57BL/6小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice鹽,英文名或英文縮寫:wo7ium malonate,級別:BR,規(guī)格:1克
SW1353細(xì)胞,人骨肉瘤細(xì)胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38(雞))
OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞曲昔匹特(標(biāo)準(zhǔn)品)Troxipide質(zhì)量規(guī)格:含量測定
豬腎細(xì)胞;PK-15香蜂草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isosakuranetin 7-O-rutinoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠抗RNF149單克隆抗體進(jìn)口BPH-1, 人前列腺增生細(xì)胞鹽酸萘替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)Naftifine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84 大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL碳酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Calcium carbonate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)甲磺酸氨氯地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Amlodipine mesylate質(zhì)量規(guī)格:含量測定