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肌酸激酶(CK) Creatine Kinase是一種重要的代謝酶,主要存在于骨骼肌和心肌細(xì)胞中,在能量代謝和運(yùn)輸中發(fā)揮關(guān)鍵作用。測定血清CK及其同工酶的活性變化,對診斷心肌梗死、肌肉疾病及判斷病情和治療效果有重要的臨床價(jià)值。 肌酸激酶(creatine kinase,CK)是一種催化肌酸和ATP之間互變的酶,它可以加速ATP的再生,提高ATP的局部濃度。添加肌酸激酶可以通過ATP再生機(jī)制提高RPA反應(yīng)體系中ATP和dNTP的濃度,增強(qiáng)DNA聚合酶的活性,實(shí)現(xiàn)更快速和更高效的擴(kuò)增,縮短反應(yīng)時(shí)間和擴(kuò)大檢出范圍。
肌酸激酶(CK) Creatine Kinase催化肌酸和ATP之間的可逆轉(zhuǎn)化反應(yīng):
肌酸+ATP ⇌ 磷酸肌酸+ADP
肌酸激酶(CK)有三種同工酶:
1. CK-MM:主要存在于骨骼肌,占全身CK活性的95%左右。
2. CK-MB:主要存在于心肌,占心肌CK活性的約20-30%。
3. CK-BB:廣泛分布于各組織,約占全身CK活性的5%。
肌酸激酶(CK) 由E.coli表達(dá)的重組蛋白,是將蛋白基因接入穩(wěn)定表達(dá)載體,經(jīng)克隆篩選,質(zhì)量驗(yàn)證,挑選的穩(wěn)定表達(dá)株,由化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基(不含有任何動(dòng)物源成分)發(fā)酵制備,工藝穩(wěn)定,保證了產(chǎn)品質(zhì)量及批次間的一致性。
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規(guī)格參數(shù):
貨號:HE04501
規(guī)格:10mg/20mg/100mg
為工業(yè)客戶提供g級和kg級。
質(zhì)量控制:
純 度: 經(jīng)高效液相色譜(SEC-HPLC)和SDS-PAGE檢測,純度大于95%.
使用說明:
長期儲(chǔ)存于-80℃,首次使用后保存于-20℃,避免反復(fù)凍融。
肌酸激酶(CK)的主要生理功能:
1. 供能貯存
CK反應(yīng)可以快速合成和分解ATP,為細(xì)胞提供緊急能量。肌酸作為CK反應(yīng)的基質(zhì),可短期貯存大量的化學(xué)能,當(dāng)需要時(shí)快速釋放,為細(xì)胞提供ATP。
2. 運(yùn)輸磷酸基團(tuán)
CK可以使高能磷酸基團(tuán)在ATP,ADP和磷酸肌酸之間轉(zhuǎn)移,參與細(xì)胞內(nèi)磷酸基團(tuán)的運(yùn)輸。
3. 維持摩爾平衡
CK可以調(diào)節(jié)ATP,ADP和磷酸肌酸之間的濃度比例,維持細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)態(tài)。
肌酸激酶(CK)的臨床意義:
1. 心肌梗死的診斷
心肌損傷時(shí),血清CK-MB和CK的活性升高,CK-MB/CK比值增加,這是診斷心肌梗死的重要指標(biāo)。
2. 肌肉疾病的診斷
肌肉損傷或肌肉變性疾病時(shí),血清CK活性升高,這可為相關(guān)疾病的診斷提供依據(jù)。
3. 監(jiān)測治療效果
血清CK活性的變化可以判斷心肌梗死或肌肉損傷治療的效果;钚曰謴(fù)正?膳袛鄵p傷已得到修復(fù)。
4. 預(yù)后判斷
心肌梗死后的CK-MB峰值和恢復(fù)正常的速度,可作為判斷病情輕重和預(yù)后的重要指標(biāo)。
肌酸激酶(CK)及其同工酶在臨床診斷與監(jiān)測主要應(yīng)用如下:
1. 心肌梗死的診斷
心肌梗死時(shí),血清CK-MB和總CK活性升高,CK-MB同工酶占比增加。這是診斷心肌梗死的金標(biāo)準(zhǔn)之一,CK-MB的變化尤為重要。
2. 評估心肌損傷范圍
心肌梗死后CK-MB活性升高幅度和峰值可反映心肌損傷范圍,為治療選擇和預(yù)后判斷提供依據(jù)。
3. 監(jiān)測再灌注治療效果
心肌梗死患者進(jìn)行再灌注治療后,血清CK-MB活性可顯示zweifall臨床癥狀改善的進(jìn)展,評估治療效果。
4. 肌肉疾病的輔助診斷
血清CK活性升高可提示肌肉損傷或變性,為相關(guān)肌肉疾病的診斷提供依據(jù)。但CK不是特異指標(biāo),需聯(lián)合其他檢查以明確診斷。
5. 術(shù)后心肌損傷監(jiān)測
心臟手術(shù)后,定期檢測血清CK-MB活性變化,可以發(fā)現(xiàn)心肌再灌注損傷等并發(fā)癥,尤其是體外循環(huán)術(shù)后。
6. 藥物心肌毒性監(jiān)測
一些藥物可導(dǎo)致心肌毒性,監(jiān)測用藥過程中血清CK-MB活性的變化,可發(fā)現(xiàn)心肌毒性作用并及時(shí)調(diào)整治療方案。
7. 運(yùn)動(dòng)損傷判斷
劇烈運(yùn)動(dòng)后血清CK活性升高,尤其以CK-MM升高為主,可判斷是否存在肌肉損傷,避免過度訓(xùn)練。
8. 預(yù)后判斷
心肌梗死患者血清CK-MB恢復(fù)正常的速度越快,預(yù)后越好。CK-MB峰值也可作為判斷心功能恢復(fù)程度的指標(biāo)。
肌酸激酶(CK)在RPA技術(shù)中應(yīng)用:
1. 提高dNTP濃度
RPA反應(yīng)需要消耗大量的dNTP來實(shí)現(xiàn)快速擴(kuò)增,而dNTP的合成又依賴于ATP。添加CK可以通過ATP再生機(jī)制提高局部ATP濃度,為dNTP的合成提供充足的底物,從而間接提高dNTP的濃度,滿足RPA反應(yīng)的需求。
2. 加快DNA聚合酶的活性
DNA聚合酶的活性依靠dNTPs的濃度,dNTP濃度的提高可以減輕其對底物的限制,加快DNA聚合酶的催化速度,實(shí)現(xiàn)更快的擴(kuò)增。
3. 提高反應(yīng)效率
dNTP和ATP濃度的增加,可以為RPA反應(yīng)提供更充足的底物,減輕底物限制的影響,實(shí)現(xiàn)反應(yīng)的最大速度,從而提高RPA的擴(kuò)增效率。
4. 縮短反應(yīng)時(shí)間
由于上述因素的疊加作用,RPA反應(yīng)可以以更快的速度實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增, 顯著縮短反應(yīng)所需的時(shí)間。這是RPA技術(shù)實(shí)現(xiàn)快速擴(kuò)增的重要措施之一。
5. 擴(kuò)大檢出范圍
RPA反應(yīng)速度和效率的提高,可以實(shí)現(xiàn)更低濃度的目標(biāo)核酸的檢出,降低檢出限,擴(kuò)大RPA的適用范圍。
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相關(guān)RPA原料:
EH03201 Bst DNA聚合酶 Bst DNA polymerase
EH04801 核酸外切酶 IV Exonuclease IV
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EH02501 M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶 M-MuLV Reverse Transcriptase
EH03301 Bsu DNA聚合酶大片段 Bsu DNA polymerase, Large Fragment
EH04501 重組肌酸激酶(CK) Creatine Kinase
EH03501 T4 UvsX重組酶 T4 UvsX Recombinase
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