AapCas12b 來源于嗜酸耐熱菌 Alicyclobacillus acidiphilus，最佳剪切反應(yīng)溫度為 60℃，比 AacCas12b更耐高溫。它屬于II型CRISPR-Cas系統(tǒng)，可利用crRNA來識別和切割DNA。AapCas12b相對分子質(zhì)量約為180kDa。它包含一個(gè)核酸酶結(jié)構(gòu)域，可與crRNA和DNA結(jié)合進(jìn)行切割。

本產(chǎn)品由E.coli表達(dá)的重組蛋白，是將蛋白基因接入穩(wěn)定表達(dá)載體，經(jīng)克隆篩選，質(zhì)量驗(yàn)證，挑選的穩(wěn)定表達(dá)株，由化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基（不含有任何動物源成分）發(fā)酵制備，工藝穩(wěn)定，保證了產(chǎn)品質(zhì)量及批次間的一致性。

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規(guī)格參數(shù)：

貨號：EH00402      

規(guī)格：100/1000pmol.

為工業(yè)客戶提供n*1000pmol規(guī)格

 

質(zhì)量控制:

純      度: 

經(jīng)高效液相色譜（SEC-HPLC）和SDS-PAGE檢測，純度大于95%.

 

使用說明：

長期儲存于-80℃，首次使用后保存于-20℃,避免反復(fù)凍融。

 

技術(shù)原理:

AapCas12b識別23bp的crRNA，crRNA的其中20bp與DNA靶區(qū)匹配。AapCas12b與crRNA和DNA結(jié)合后，激活其內(nèi)切酶活性，在靶DNA下游位點(diǎn)挑選TTTV型的PAM序列，從而切割靶DNA。

 

特點(diǎn)與優(yōu)勢:

(1)AapCas12b產(chǎn)生5'懸掛端和3'突出的四核苷酸，這可有利于后續(xù)的基因修飾。

(2)AapCas12b具有較高的靶向靈活性，可識別TTTV的PAM，對應(yīng)更多潛在的靶點(diǎn)。

(3)AapCas12b在植物細(xì)胞中的效率較高，可實(shí)現(xiàn)更高效的基因編輯。

(4)AapCas12b產(chǎn)生的切割產(chǎn)物末端較平滑，可用于獲得更高的基因編輯效率。

 

AapCas12b應(yīng)用:

AapCas12b可用于CRISPR基因編輯，實(shí)現(xiàn)基因敲除、替換、激活及抑制等。

(1)作物基因組編輯：實(shí)現(xiàn)作物性狀的改良與優(yōu)化。

(2)生物醫(yī)學(xué)研究：用于研究基因功能、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等機(jī)制。

(3)病毒載體構(gòu)建：用于構(gòu)建基因治療載體，傳送至靶細(xì)胞實(shí)現(xiàn)體內(nèi)基因編輯。

(4)抗菌靶向：可用于研發(fā)針對某些條件致病菌的靶向治療方法。

 

AapCas12b在體外診斷IVD領(lǐng)域有重要的應(yīng)用潛力：

1. 基因檢測

AapCas12b可通過crRNA檢測靶DNA的存在，用于實(shí)現(xiàn)基因突變、病原體DNA等的檢測。

工作流程如下:

(1) 設(shè)計(jì)與靶DNA或突變位點(diǎn)互補(bǔ)的crRNA。

(2) 將crRNA與檢測樣本中的DNA共同溫育。

(3) 如果存在互補(bǔ)的靶DNA，AapCas12b與之結(jié)合并激活，切割靶DNA。

(4) 通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增切割產(chǎn)物，或通過熒光定量PCR檢測AapCas12b的活性，判斷靶DNA是否存在。

(5) 相比PCR方法，這種基于Cas12的檢測更加特異和靈敏，實(shí)現(xiàn)快速高通量的體外診斷。

2. 病原體檢測

選擇與病原體如病毒、細(xì)菌DNA高度保守的區(qū)域設(shè)計(jì)crRNA，可特異性檢測該病原體，用于臨床快速診斷及流行病監(jiān)測。

3. 腫瘤相關(guān)突變檢測

針對常見的腫瘤相關(guān)基因突變設(shè)計(jì)crRNA，可實(shí)現(xiàn)腫瘤標(biāo)記物和治療靶點(diǎn)的檢測，用于腫瘤的早期診斷和針對性治療。

4. 胎兒遺傳病檢測

檢測胎兒DNA中相關(guān)遺傳病突變位點(diǎn)，用于產(chǎn)前診斷。優(yōu)點(diǎn)是檢測快速，通量高和成本低。

5. 轉(zhuǎn)基因生物檢測

可檢測常見轉(zhuǎn)基因生物中引入的外源DNA，用于食品安全性監(jiān)測和環(huán)境檢測。

AapCas12b作為一種新型的CRISPR效應(yīng)蛋白,其基于RNA指導(dǎo)的DNA靶向切割功能,使其在體外快速檢測和診斷方面具有重要的應(yīng)用優(yōu)勢。

 

相關(guān)RPA原料：

EH04401 DNA重組酶 Recombinase A

EH03201 Bst DNA聚合酶 Bst DNA polymerase

EH04801 核酸外切酶 IV Exonuclease IV

EH04701 核酸外切酶 III Exonuclease III

EH02501 M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶 M-MuLV Reverse Transcriptase

EH03301 Bsu DNA聚合酶大片段 Bsu DNA polymerase, Large Fragment

EH04501 重組肌酸激酶(CK) Creatine Kinase

EH03501 T4 UvsX重組酶 T4 UvsX Recombinase

EH03401 T4噬菌體基因32編碼蛋白(gp 32) T4 gene 32 Protein

EH03601 T4 UvsY蛋白 T4 UvsY Protein

HM0058 重組鼠源RNase抑制劑(40 U/µL) RNase Inhibitor

 

相關(guān)探針產(chǎn)品推薦：

HC80202-01 Crispr Cas12a檢測系統(tǒng)用熒光雙標(biāo)記探針（DNA熒光-淬滅雙標(biāo)記） 1OD/950元

HC80202-02 Crispr Cas13a檢測系統(tǒng)用熒光雙標(biāo)記探針（RNA熒光-淬滅雙標(biāo)記） 1OD/950元

HC80202-03 Crispr Cas13a檢測系統(tǒng)用雙標(biāo)記探針（RNA Biotin和FAM雙標(biāo)記） 1OD/1350元

HC80202-04 Crispr Cas12a檢測系統(tǒng)用雙標(biāo)記探針（DNA Biotin和FAM雙標(biāo)記）1OD/1150元

HC80202-05 Cas14a檢測系統(tǒng)用熒光雙標(biāo)記探針（DNA熒光-淬滅雙標(biāo)記）1OD/950元

HC80202-06 Cas14a檢測系統(tǒng)用雙標(biāo)記探針（DNA Biotin和FAM雙標(biāo)記）1OD/1150元

 

RAA/RPA試劑盒推薦：

HP90206-48 RT-RAA核酸擴(kuò)增試劑盒(試劑條法)

HP90204-48 RT-RAA核酸擴(kuò)增試劑盒(熒光法)

HP90202-48 RT-RAA核酸擴(kuò)增試劑盒（基礎(chǔ)型）

HP90205-48 RAA核酸擴(kuò)增試劑盒(試劑條法)

HP90203-48 RAA核酸擴(kuò)增試劑盒(熒光法)

HP90201-48 RAA核酸擴(kuò)增試劑盒（基礎(chǔ)型）

 

相關(guān)Crispr/cas酶：

 

重組CRISPR-Cas9蛋白 

重組CRISPR-Cas12a蛋白

重組CRISPR-LwaCas13a蛋白

LbuCas13a 核酸酶

AapCas12b 核酸酶

AacCas12b 核酸酶

CRISPR Cas9-NLS

AsCas12a(cpf1)

AsCas12a(cpf1)-NLS

FnCas12a(cpf1)

FnCas12a(cpf1)-NLS

LbCas12a(cpf1)-NLS

AapCas12b

AacCas12b(C2c1)

CRISPR LbCas12a(cpf1)

CRISPR BbCas12a(cpf1)

CRISPR HkCas12a(cpf1)蛋白

OsCas12a(cpf1)蛋白

BoCas12a(cpf1)蛋白

TsCas12a(cpf1)蛋白

dCas9蛋白

Cas14a1核酸酶

 

其他相關(guān)蛋白產(chǎn)品：

SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (S1 Subunit, His Tag)

SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (RBD, mFc Tag)

重組TEV蛋白酶 Recombinant TEV Protease

重組SUMO蛋白酶 Recombinant SUMO Protease

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特色產(chǎn)品：

生命科學(xué)：Crispr系列產(chǎn)品，組織因子，電泳預(yù)制膠，熒光染料，核酸探針，大包裝新冠抗原抗體，工業(yè)用酶

分析化學(xué)：糖化學(xué)研究，脂類分析，植物分析，聚合物分析，醫(yī)藥分析，試劑盒

生化試劑：PEG衍生物，多肽，大包裝膠體金輔料，大包裝生物醫(yī)藥輔料，通用生化試劑

儀器耗材：生物上游工藝，生物下游工藝，細(xì)胞治療，微生物監(jiān)測，理化分析，公用系統(tǒng)。

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生化試劑：

Aladdin阿拉丁、Avanti、Broadpharm、Focus、Laysan、LKT、Macklin麥克林、Sigma、TCI、Thermo Fisher、vivitide

儀器耗材：

湘儀、精騏、Corning、Eppordorf、浙江孚夏、力康、海爾、匯松、赫西、Mettler Toledo、Millipore、NEST、松下、Pall、Rainin瑞寧、Whatman、上海一恒