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                                ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒
                                英文名稱:總訪問:324
                                國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口:國(guó)產(chǎn)半年訪問:12
                                產(chǎn)地/品牌:上海一基品牌產(chǎn)品類別:其他生物試劑
                                規(guī)       格:ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒 最后更新:2025-2-13
                                貨       號(hào):
                                CAS   號(hào):
                                參考報(bào)價(jià):規(guī)格:50ml/100ml,價(jià)格:140/245元
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                                • 公司簡(jiǎn)介
                                規(guī)格:50ml/100ml,價(jià)格:140/245元,產(chǎn)品簡(jiǎn)介
                                ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒用于Western blot的化學(xué)發(fā)光檢測(cè),比DAB顯色的靈敏度至少高50倍,可達(dá)ng水平。原理是采用新型發(fā)光底物(Luminol),可與二抗上耦連的辣根過氧化物酶發(fā)生化學(xué)反應(yīng),發(fā)出熒光,從而可以通過用X光片壓片或其它適當(dāng)熒光成像設(shè)備檢測(cè)樣品。在電泳的過程中,將復(fù)雜的蛋白混合物經(jīng)SDS-PAGE分離,并轉(zhuǎn)移到固相膜上(如PVDF、NC)等,經(jīng)辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗與膜上的蛋白直接反應(yīng)。當(dāng)加入ECL化學(xué)發(fā)光試劑后,Luminol發(fā)生氧化降解,并發(fā)射波長(zhǎng)為428nm的光,此光可經(jīng)X光片(放射自顯影片)感光記錄下來。
                                試劑盒組份
                                存儲(chǔ)溫度
                                A液 (避光) 25 mL      50mL 4℃
                                B 液 25 mL 50mL 4℃
                                試劑盒以外自備儀器和試劑
                                鑷子,1.5ml離心管,X光片,暗盒,顯影液,定影液、去離子水
                                操作步驟
                                1、 按照常規(guī)的Western實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作到二抗孵育和洗滌后的膜待用。2、 ECL工作液的配制:        取1.5ml的eppendorf管,加入500μL A液和500μL B 液,混勻后即為ECL工作液(配制后請(qǐng)盡快使用)。3、 用平頭鑷將膜取出,用吸水紙略吸去過多的液體(切勿接觸膜的蛋白面),然后置于一潔凈保鮮膜上。4、 根據(jù)膜的大小,按每10平方厘米膜加1ml ECL工作液的比例,滴加ECL工作液到膜上,確保使工作液均勻覆蓋在膜上,放置1-2分鐘。         5、取膜,棄ECL工作液,用吸水紙略吸去過多的液體。將膜放在兩片保鮮膜中間,小心趕盡氣泡。          6、將膜固定于片夾內(nèi)。暗室內(nèi)壓片1分鐘,立即顯影定影,根據(jù)結(jié)果再調(diào)整壓片時(shí)間;蛑苯臃謩e壓片30秒,1,3,5分鐘,然后一起顯影定影觀察結(jié)果。
                                保存條件
                                4℃避光保存,一年有效。
                                注意事項(xiàng)
                                1、 A液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭,A液和B液相互污染后會(huì)導(dǎo)致A液或B液逐漸失效,影響后續(xù)的使用效果。2、 各溶液使用后,請(qǐng)蓋緊瓶蓋,以防失效。特別是B液,含有氧化劑,比較容易被還原而失效。3、 A液和B液均對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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