規(guī)格:50ml/100ml,價(jià)格:140/245元,產(chǎn)品簡(jiǎn)介
ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒用于Western blot的化學(xué)發(fā)光檢測(cè),比DAB顯色的靈敏度至少高50倍,可達(dá)ng水平。原理是采用新型發(fā)光底物(Luminol),可與二抗上耦連的辣根過氧化物酶發(fā)生化學(xué)反應(yīng),發(fā)出熒光,從而可以通過用X光片壓片或其它適當(dāng)熒光成像設(shè)備檢測(cè)樣品。在電泳的過程中,將復(fù)雜的蛋白混合物經(jīng)SDS-PAGE分離,并轉(zhuǎn)移到固相膜上(如PVDF、NC)等,經(jīng)辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗與膜上的蛋白直接反應(yīng)。當(dāng)加入ECL化學(xué)發(fā)光試劑后,Luminol發(fā)生氧化降解,并發(fā)射波長(zhǎng)為428nm的光,此光可經(jīng)X光片(放射自顯影片)感光記錄下來。
試劑盒組份
存儲(chǔ)溫度
A液 (避光) 25 mL 50mL 4℃
B 液 25 mL 50mL 4℃
試劑盒以外自備儀器和試劑
鑷子,1.5ml離心管,X光片,暗盒,顯影液,定影液、去離子水
操作步驟
1、 按照常規(guī)的Western實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作到二抗孵育和洗滌后的膜待用。2、 ECL工作液的配制: 取1.5ml的eppendorf管,加入500μL A液和500μL B 液,混勻后即為ECL工作液(配制后請(qǐng)盡快使用)。3、 用平頭鑷將膜取出,用吸水紙略吸去過多的液體(切勿接觸膜的蛋白面),然后置于一潔凈保鮮膜上。4、 根據(jù)膜的大小,按每10平方厘米膜加1ml ECL工作液的比例,滴加ECL工作液到膜上,確保使工作液均勻覆蓋在膜上,放置1-2分鐘。 5、取膜,棄ECL工作液,用吸水紙略吸去過多的液體。將膜放在兩片保鮮膜中間,小心趕盡氣泡。 6、將膜固定于片夾內(nèi)。暗室內(nèi)壓片1分鐘,立即顯影定影,根據(jù)結(jié)果再調(diào)整壓片時(shí)間;蛑苯臃謩e壓片30秒,1,3,5分鐘,然后一起顯影定影觀察結(jié)果。
保存條件
4℃避光保存,一年有效。
注意事項(xiàng)
1、 A液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭,A液和B液相互污染后會(huì)導(dǎo)致A液或B液逐漸失效,影響后續(xù)的使用效果。2、 各溶液使用后,請(qǐng)蓋緊瓶蓋,以防失效。特別是B液,含有氧化劑,比較容易被還原而失效。3、 A液和B液均對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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上海一基實(shí)業(yè)有限公司主要生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)國(guó)家級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品,實(shí)驗(yàn)室耗材等。同時(shí)代理美國(guó)、日本、英國(guó),德國(guó)等國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)樣品。本著標(biāo)準(zhǔn)第一、質(zhì)量第一,服務(wù)第一,信譽(yù)第一的宗旨,為客戶提供售前.售中.售后的優(yōu)質(zhì)服務(wù)。我公司全體工作人員真誠(chéng)的歡迎國(guó)內(nèi)外客戶的大力支持與合作。
業(yè)務(wù)范圍:
a, 銷售中檢所、自制標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品及進(jìn)口試劑
b, 承接克級(jí)至公斤級(jí)高純度單體的定制業(yè)務(wù)
c, 承接中藥單體/標(biāo)準(zhǔn)品新品研發(fā)業(yè)務(wù)