動(dòng)物組織石蠟切片糖蛋白高碘酸希爾法品紅亞硫酸鹽染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

（中文版）

 

主要用途

動(dòng)物組織石蠟切片糖蛋白高碘酸希爾法品紅亞硫酸鹽染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟方法的基礎(chǔ)上，通過(guò)高碘酸氧化糖蛋白中的糖基為乙醛，使用品紅亞硫酸鹽染料，產(chǎn)生品紅色或紫紅色，來(lái)分析存檔中的石蠟包埋的組織切片樣本中糖蛋白成分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良傳統(tǒng)方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于石蠟包埋組織切片中的的糖蛋白成分檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。

 

技術(shù)背景

 

高碘酸（periodic acid）可以氧化糖蛋白中的多糖（polysaccharide）糖基，包括乙二醇（1,2-glycol）中的碳原子，成為乙醛基團(tuán)（aldehyde group），與希爾試劑（Schiff’s Reagent），即品紅亞硫酸鹽染料（fuchsin sulfite）發(fā)生反應(yīng)，呈現(xiàn)品紅色（magenda）或紫紅色，表明糖蛋白陽(yáng)性。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

去石蠟液（Reagent A）       300毫升

補(bǔ)水液A（Reagent B）  100毫升

補(bǔ)水液B（Reagent C）  100毫升

補(bǔ)水液C（Reagent D）  100毫升

補(bǔ)水液D（Reagent E）  100毫升

清理液（Reagent F）  150毫升

氧化液（Reagent G）   10毫升

染色液（Reagent H）   10毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)    1份

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent H），嚴(yán)格密封瓶口，避免光照；氧化液（Reagent G）和染色液（Reagent H）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月

 

用戶自備

 

通用型蘇木素復(fù)染試劑盒（80067.1）：用于常規(guī)染色后復(fù)染

小型染色缸：用于細(xì)胞染色操作

光學(xué)顯微鏡：用于細(xì)胞染色后觀察分析

 

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

• 去石蠟處理

 

• 取出10片待測(cè)的石蠟包埋的5微米厚組織切片 
• 放進(jìn)80℃烘箱，孵育30分鐘
• 室溫下靜置15分鐘
• 按下表依次放進(jìn)小染色缸里孵育

染色缸	孵育時(shí)間
50毫升去石蠟液（Reagent A）	15分鐘
50毫升去石蠟液（Reagent A）	15分鐘
50毫升去石蠟液（Reagent A）	15分鐘
50毫升補(bǔ)水液A（Reagent B）	3分鐘
50毫升補(bǔ)水液B（Reagent C）	3分鐘
50毫升補(bǔ)水液C（Reagent D）	3分鐘
50毫升補(bǔ)水液D（Reagent E）	3分鐘

 

• 小心移去切片上的補(bǔ)水液D（Reagent E）
• 小心加上200微升清理液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面
• 室溫下孵育5分鐘
• 小心移去切片上的清理液（Reagent F）

 

• 樣本氧化處理

 

• 小心加上200微升氧化液（Reagent G），鋪滿整個(gè)樣品表面
• 室溫下，孵育5分鐘
• 小心移去載玻片上的氧化液（Reagent G）
• 小心加上200微升清理液（Reagent F），清洗樣品表面
• 小心移去載玻片上的清理液（Reagent F）
• 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至5一次

三、樣本染色處理

• 小心加上200微升染色液（Reagent H），鋪滿整個(gè)載玻片樣品表面
• 室溫下孵育30分鐘；或直至可見(jiàn)深紅色
• 小心移去載玻片上的染色液（Reagent H）
• 室溫下，小心將載玻片置入50毫升清理液（Reagent F）中孵育5分鐘
• 小心移去載玻片上的清理液（Reagent F）

 

四、 （選擇步驟）樣本復(fù)染處理

 

• 樣本復(fù)染處理（建議使用通用型蘇木素復(fù)染試劑盒－80067.1）
• 放上蓋玻片或封片
• 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：呈現(xiàn)紫紅色或品紅色為糖蛋白陽(yáng)性細(xì)胞，細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色（復(fù)染）

 

注意事項(xiàng)

 

• 本產(chǎn)品為50次操作
• 操作時(shí)，須戴手套
• 避免單純使用甲醛和乙醛等處理樣品；建議使用 Bouin固著液—12267
• 所有操作在室溫下進(jìn)行
• 試劑可以重復(fù)使用
• 氧化液（Reagent G）和染色液（Reagent H）具有腐蝕性，注意操作安全
• 染色液（Reagent H）出現(xiàn)沉淀，可以溫?zé)帷�攪拌或過(guò)濾后使用
• 染色液（Reagent H）須密封避光，如果變成紅色，則影響染色效果
• 試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿樣品表面
• 樣品染色避免過(guò)度，肉眼可見(jiàn)深紅色即可終止染色
• 建議使用通用型蘇木素復(fù)染試劑盒（80067.1），增強(qiáng)染色對(duì)比度
• 組織細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 
• 本公司提供系列糖蛋白分析試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰

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