大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
主要用途
大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑是一種旨在通過特殊親酯溶液聚集脂多糖類物質(zhì),達(dá)到清除蛋白樣品中混雜的內(nèi)毒素分子的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種重組蛋白制備樣品以及血清樣品的純化。產(chǎn)物可用于各種后續(xù)動物和細(xì)胞生物學(xué)操作。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作方便,清除效率高。
技術(shù)背景
內(nèi)毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞膜的組成成分。在重組蛋白純化過程中,細(xì)菌裂解釋放出內(nèi)毒素,伴隨著目標(biāo)蛋白,嚴(yán)重干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。去內(nèi)毒素技術(shù)采用了特異親酯溶液充分有效地清除高濃度內(nèi)毒素(4000至40000 EU/毫升)和其它親脂性物質(zhì),高達(dá)99%以上效率,充分保留蛋白的抗原活性和質(zhì)量。避免層析法的非特異性蛋白結(jié)合、免疫活性損失、和部分去內(nèi)毒素失效以及昂貴的缺點(diǎn)。
產(chǎn)品內(nèi)容
去毒液(Reagent A) 5毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
臺式離心機(jī):用于沉淀分層
渦旋震蕩儀:用于混勻反應(yīng)物
恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物
平式搖蕩儀:用于混勻反應(yīng)物
實(shí)驗(yàn)步驟
- 從-70℃冰箱里取出蛋白樣品,置于冰槽里融化
- 移取10毫升蛋白樣品(50至100毫克蛋白總量)到15毫升錐形離心管
- 加入1毫升去毒液(Reagent A)(注意:使用前,充分混勻去毒液(Reagent A))
- 渦旋震蕩15秒
- 在4℃條件下,橫放離心管,置于平式搖蕩儀上孵育30分鐘,速度為50RPM
- 放進(jìn)37℃恒溫水槽孵育10分鐘,期間渦旋震蕩2次
- 放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g
- 小心取出離心管,避免震動
- 小心移取上層液相(留下1.5毫升下層液相)到新的1.5毫升離心管
- (選擇步驟)根據(jù)需要,重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟7至9一次
- 保存在-70℃冰箱里備用或即刻進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng)
- 本產(chǎn)品為5次操作
- 本產(chǎn)品采用特殊親脂溶液
- 使用去毒液(Reagent A)前,充分混勻,然后使用1毫升槍頭移液
- 不同樣品容量的操作,建議相應(yīng)調(diào)整試劑用量:樣品容量與試劑用量之比為10:1
- 如果樣品中內(nèi)毒素含量過高,建議重復(fù)操作3次
- 血清樣品采用相同操作步驟,但須無菌操作
- 100毫升菌液的平均內(nèi)毒素含量可高達(dá)15000 EU(30微克),介于5000至50000 EU
- 去內(nèi)毒素程度取決于樣品中內(nèi)毒素含量和樣品性質(zhì)(細(xì)菌來源、融合蛋白特性),可以通過多次處理,達(dá)到徹底清除的效果;如果效果不甚理想,建議使用蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒-30046.1
- 經(jīng)過本產(chǎn)品處理后的產(chǎn)物含有90%的蛋白成分以及100%的免疫源性
- 本公司提供系列內(nèi)毒素處理試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去內(nèi)毒素程度高
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