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大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒
英文名稱:QQ 2851717098總訪問:206
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:34
產(chǎn)地/品牌:上海一基產(chǎn)品類別:其他實(shí)驗(yàn)耗材
規(guī)       格:48T 96T 最后更新:2024-12-3
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大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)

 

主要用途

大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑是一種旨在通過特殊親酯溶液聚集脂多糖類物質(zhì),達(dá)到清除蛋白樣品中混雜的內(nèi)毒素分子的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種重組蛋白制備樣品以及血清樣品的純化。產(chǎn)物可用于各種后續(xù)動物和細(xì)胞生物學(xué)操作。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作方便,清除效率高。

 

技術(shù)背景

 

內(nèi)毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞膜的組成成分。在重組蛋白純化過程中,細(xì)菌裂解釋放出內(nèi)毒素,伴隨著目標(biāo)蛋白,嚴(yán)重干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。去內(nèi)毒素技術(shù)采用了特異親酯溶液充分有效地清除高濃度內(nèi)毒素(4000至40000 EU/毫升)和其它親脂性物質(zhì),高達(dá)99%以上效率,充分保留蛋白的抗原活性和質(zhì)量。避免層析法的非特異性蛋白結(jié)合、免疫活性損失、和部分去內(nèi)毒素失效以及昂貴的缺點(diǎn)。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

去毒液(Reagent A)   5毫升

產(chǎn)品說明書                 1份

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里,有效保證6月

 

用戶自備

 

15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

臺式離心機(jī):用于沉淀分層

渦旋震蕩儀:用于混勻反應(yīng)物

恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物

平式搖蕩儀:用于混勻反應(yīng)物

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

  • 從-70℃冰箱里取出蛋白樣品,置于冰槽里融化
  • 移取10毫升蛋白樣品(50至100毫克蛋白總量)到15毫升錐形離心管
  • 加入1毫升去毒液(Reagent A)(注意:使用前,充分混勻去毒液(Reagent A)
  • 渦旋震蕩15秒
  • 在4℃條件下,橫放離心管,置于平式搖蕩儀上孵育30分鐘,速度為50RPM
  • 放進(jìn)37℃恒溫水槽孵育10分鐘,期間渦旋震蕩2次
  • 放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g
  • 小心取出離心管,避免震動
  • 小心移取上層液相(留下1.5毫升下層液相)到新的1.5毫升離心管
  • (選擇步驟)根據(jù)需要,重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟7至9一次
  • 保存在-70℃冰箱里備用或即刻進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)

 

注意事項(xiàng)

 

  • 本產(chǎn)品為5次操作
  • 本產(chǎn)品采用特殊親脂溶液
  • 使用去毒液(Reagent A)前,充分混勻,然后使用1毫升槍頭移液
  • 不同樣品容量的操作,建議相應(yīng)調(diào)整試劑用量:樣品容量與試劑用量之比為10:1
  • 如果樣品中內(nèi)毒素含量過高,建議重復(fù)操作3次
  • 血清樣品采用相同操作步驟,但須無菌操作
  • 100毫升菌液的平均內(nèi)毒素含量可高達(dá)15000 EU(30微克),介于5000至50000 EU
  • 去內(nèi)毒素程度取決于樣品中內(nèi)毒素含量和樣品性質(zhì)(細(xì)菌來源、融合蛋白特性),可以通過多次處理,達(dá)到徹底清除的效果;如果效果不甚理想,建議使用蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒-30046.1
  • 經(jīng)過本產(chǎn)品處理后的產(chǎn)物含有90%的蛋白成分以及100%的免疫源性
  • 本公司提供系列內(nèi)毒素處理試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去內(nèi)毒素程度高
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