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高質(zhì)型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
主要用途
高質(zhì)型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑是一種旨在通過非放射性（辣根過氧化酶）發(fā)光系統(tǒng)，檢測(cè)固定在固相膜上（如NC、PVDF等）的蛋白，經(jīng)X光片（放射自顯影片）感光記錄其免疫印跡的實(shí)驗(yàn)輔助試劑。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于辣根過氧化酶標(biāo)記蛋白的免疫學(xué)檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，敏感度高，顯色清晰，重復(fù)性好。
技術(shù)背景
蛋白（1至10pg）固定在固相免疫印跡膜上，進(jìn)行辣根過氧化酶（HRP）標(biāo)記處理，加入免疫印跡化學(xué)發(fā)光試劑，辣根過氧化酶使發(fā)光物（Luminol）氧化降解并發(fā)光（波長為428nm），用X光片快速獲得永久的硬拷貝結(jié)果。
產(chǎn)品內(nèi)容
發(fā)光液A（Reagent A） 100毫升
發(fā)光液B（Reagent B） 500微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存發(fā)光液A（Reagent A）和發(fā)光液B（Reagent B）在4℃冰箱里；發(fā)光液A（Reagent A），避免光照，有效保證6月
用戶自備
固相膜：用于蛋白轉(zhuǎn)移的載體
15毫升錐形離心管：用于發(fā)光工作液配制的容器
平式搖蕩儀：用于孵育和混勻反應(yīng)
X光片：用于發(fā)光顯影
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，將4℃冰箱里的試劑盒中的發(fā)光液A（Reagent A）和發(fā)光液B（Reagent B）置入室溫下，移出10毫升發(fā)光液A（Reagent A）到15毫升錐形離心管，加入30微升發(fā)光液B（Reagent B），混勻后，標(biāo)記為發(fā)光工作液，用錫箔紙包裹，避免光照。然后進(jìn)行下列操作。
- 準(zhǔn)備好含有待測(cè)蛋白的固相膜（5 X 8 cm2）：包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過氧化酶（HRP）標(biāo)記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟
- 加入8至10毫升室溫預(yù)熱的發(fā)光工作液，鋪滿整個(gè)固相膜表面
- 置于平式搖蕩儀上，在室溫下孵育1分鐘，避免光照
- 用鑷子夾起固相膜，一角放在吸水紙上，吸干發(fā)光液
- 用保鮮膜塑料紙包住，避免氣泡
- 置于X光片夾壓片（膜片蛋白吸附面面向X光片），曝光10秒至15分不等
注意事項(xiàng)
- 本產(chǎn)品為10次操作（1000 cm2膜片）
- 建議6至8毫升用于1張5 X 8 cm2膜片；8至10毫升用于1張8 X 10 cm2膜片
- 操作時(shí)，須戴手套
- 膜片封閉和洗滌處理十分重要
- 孵育時(shí)，避免光照
- 曝光時(shí)間需根據(jù)情況調(diào)整
- 膜片印跡可去除后重新探查，建議使用免疫印跡化學(xué)發(fā)光印跡消除試劑盒－30006.2
- 本公司提供非化學(xué)發(fā)光：二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色產(chǎn)品
- 本公司提供系列免疫印跡發(fā)光試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯影清晰
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