血液單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
主要用途
YIJI血液單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞分離試劑是一種旨在通過聚糖和泛影葡胺混合液,達(dá)到特定比重,然后離心分層以獲得純化完整的單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗證明的?梢员挥糜趩魏税准(xì)胞/淋巴細(xì)胞的分離、鑒定、染色、標(biāo)記、培養(yǎng)、DNA萃取、線粒體分離、細(xì)胞因子測定和細(xì)胞流式儀分析等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡易,分離出色,性能穩(wěn)定,細(xì)胞活性保證。
技術(shù)背景
全血溶液含有血清、各種蛋白因子、無核血紅細(xì)胞、血小板、多核白細(xì)胞和單核白細(xì)胞等。為了獲得純化完整的單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞,采用Boyum(1968)的比重(1.077克/毫升)離心技術(shù),可以方便快速地從全血和骨髓中分離。
產(chǎn)品內(nèi)容
YIJI分離液(Reagent A) 50毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
PBS緩沖溶液(GMS12033):用于清洗淋巴細(xì)胞
淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液(GMS12137.1):用于分離后淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)
白細(xì)胞凍存液(GMS10001.2):用于分離后淋巴細(xì)胞的長期保存
15毫升錐形離心管:用于細(xì)胞操作的容器
50毫升錐形離心管:用于細(xì)胞操作的容器
2毫升無菌塑料吸管:用于抽吸淋巴細(xì)胞層液體
臺式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞
實(shí)驗步驟
實(shí)驗開始前,室溫預(yù)熱YIJI分離液(Reagent A)。然后進(jìn)行下列操作。
- 準(zhǔn)備1個無菌的15毫升錐形離心管
- 加入5毫升YIJI分離液(Reagent A)
- 小心沿著管壁,接近分離液層面,非常緩慢地加入5毫升新鮮的EDTA抗凝的全血樣品在YIJI分離液(Reagent A)上面(注意:切記不要攪渾YIJI分離液(Reagent A))
- 小心放進(jìn)臺式離心機(jī)離心30分鐘,速度為1500g(注意:建議離心機(jī)設(shè)置加速和制動均為零)
- 小心取出離心管,切記不要震動
- 可見:最上層為血漿(為淡紅色通明),其次為薄薄的致密白色環(huán)狀層(Buffy Coat),然后為離心液層,最后為紅色沉淀在管底的紅細(xì)胞層
- 小心抽掉白色環(huán)狀層以上三分之二血漿液,切記不要攪動白色環(huán)狀層
- 用2毫升無菌塑料吸管小心吸取白色環(huán)狀層液體
- 移入到新的無菌的50毫升錐形離心管
- 加入48毫升用戶自備的PBS緩沖溶液
- 輕柔上下傾倒混勻
- 放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g
- 小心倒掉上清液
- 用手指輕彈離心管2至3下,使白細(xì)胞顆粒群松動
- (選擇步驟)加入5毫升用戶自備的淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)
- (選擇步驟)或加入1毫升用戶自備的白細(xì)胞凍存液,放進(jìn)-80℃凍存
- (選擇步驟)或即刻進(jìn)行各種后續(xù)實(shí)驗(包括白細(xì)胞分離、鑒定、染色、標(biāo)記、DNA萃取、線粒體分離、細(xì)胞因子測定和細(xì)胞流式儀分析等)
注意事項
- 本產(chǎn)品為10次操作(5毫升全血/次)
- 所有操作均須無菌狀態(tài)下進(jìn)行
- 操作時,須戴手套
- 操作時,在室溫下進(jìn)行
- 使用時,切莫污染母液
- 建議使用新鮮全血
- 全血樣品采集須使用血液抗凝液 (參見訂購信息)
- 如果血液出現(xiàn)凝塊,不宜進(jìn)行分離操作
- 全血樣品和YIJI分離液(Reagent A)的使用比例為1:1,即1毫升全血,加1毫升YIJI分離液(Reagent A);如需要增加或減少全血量,則按比例相應(yīng)增加或減少YIJI分離液(Reagent A)
- 本產(chǎn)品細(xì)胞回收率70%以上,細(xì)胞存活率98%以上
- 本公司提供系列血液研究試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離細(xì)胞活性保證
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