聚乙烯醇分子生物學(xué)技術(shù)(zt)：

分子生物學(xué)技術(shù) 真核細(xì)胞DNA的制備與定量|質(zhì)粒DNA的堿裂解法提取與純化|λ噬菌體DNA提取|DNA分子的限制性內(nèi)切酶消化|DNA片段回收與純化|目的基因的亞克隆|PCR|引物參數(shù)計(jì)算|PCR產(chǎn)物的克隆|DNA序列測定|Southern 雜交|PCR-SSCP|細(xì)胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA的制備|mRNA的分離與純化|RT-PCR|Northern Blot|RPA|ddPCR|原位雜交|原核表達(dá)|蛋白SDS電泳|Western|表達(dá)蛋白的分離與純化|表達(dá)蛋白的生物學(xué)活性的檢測|真核轉(zhuǎn)染。

聚乙烯醇試劑準(zhǔn)備：

1．TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。

2．TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。

3．裂解緩沖液：250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。

4．20% SDS

5．2mg/ml蛋白酶K

6．Tris飽和酚（pH 8.0）、酚/氯仿（酚∶氯仿=1∶1）、氯仿

7．無水乙醇、75%乙醇

聚乙烯醇注意事項(xiàng)：

1. 所有用品均需要高溫高壓，以滅活殘余的DNA酶。

2. 所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配制。

3. 用大口滴管或吸頭操作，以盡量減少打斷DNA的可能性。

4. 用上述方法提取的DNA純度可以滿足一般實(shí)驗(yàn)（如Southern 雜交、PCR等）目的。如要求更高，可參考有關(guān)資料進(jìn)行DNA純化。

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