c7b8c3小鼠7在進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)的時(shí)候，胰蛋白酶作用的時(shí)間是在1～3分鐘，由于我有好幾個(gè)培養(yǎng)瓶（4個(gè)以上）的細(xì)胞都需要進(jìn)行傳代操作，那么就胰酶消化這一步而言，我是該一個(gè)培養(yǎng)瓶一個(gè)培養(yǎng)瓶這么分開做，還是可以幾個(gè)同時(shí)做呢？同時(shí)做我怕后來操作的培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞消化過度��！一個(gè)一個(gè)的做會(huì)不會(huì)又太費(fèi)時(shí)呢？

培養(yǎng)基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生長特性 半貼壁生長

1、一個(gè)一個(gè)做！防止污染，和消化細(xì)胞時(shí)間的不均勻。

2、原則上，為了避免細(xì)胞系之間的污染，應(yīng)該一個(gè)一個(gè)的做。但是如果你能保證無菌操作的原則，c7b8c3小鼠7也能把握好各種貼壁細(xì)胞系消化的時(shí)間，是可以同時(shí)做，這樣效率高。建議你剛開始一個(gè)一個(gè)的做，熟練以后根據(jù)具體情況決定如何做。

3、4個(gè)可以同時(shí)做，時(shí)間到了用移液槍給4個(gè)瓶加含血清的培養(yǎng)基終止就行。

4、新手的話強(qiáng)烈建議一個(gè)一個(gè)處理細(xì)胞，特別是消化，除非你養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)消化都不敏感，不然很容易消化過度或者不到位。另外同時(shí)處理多個(gè)細(xì)胞容易出現(xiàn)細(xì)胞間交叉污染，一旦污染基本沒救，比細(xì)菌污染還要麻煩。

5、剛開始還是一個(gè)一個(gè)來，c7b8c3小鼠7消化的時(shí)間與細(xì)胞的來源有很大關(guān)系，貼壁性強(qiáng)的細(xì)胞，需要消化的時(shí)間較長。一般除了貼壁性強(qiáng)的癌細(xì)胞外，細(xì)胞消化時(shí)間1-3min，還有胰蛋白酶的濃度有關(guān)系，濃度高的消化時(shí)間要短一些，不然會(huì)消化過了，對(duì)于細(xì)胞的生長不好。你可以在分散打入胰蛋白酶時(shí)，輕晃培養(yǎng)瓶，在顯微鏡下看見細(xì)胞開始變亮，皺縮，卷邊的時(shí)候就加入培養(yǎng)液或者血清終止消化。

失敗的關(guān)鍵原因還是細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候沒有迅速解凍的緣故，最后一次成功是因?yàn)樽⒁獾竭@個(gè)問題。細(xì)胞的復(fù)蘇及凍存遵循慢凍速融原則，如果c7b8c3小鼠7取出后沒有在盡可能短的時(shí)間里解凍的話細(xì)胞內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生很多冰晶對(duì)細(xì)胞就有致命的損失了。另外，細(xì)胞的確應(yīng)該是在液氮條件下保存，如果液氮可以保存1-2年的細(xì)胞，放-80度保存恐怕不到三個(gè)月就不行了，并且狀態(tài)會(huì)很差。HO-8910    人源化細(xì)胞株    生殖系統(tǒng)    5x10^5    人卵巢癌細(xì)胞
JEG3    人源化細(xì)胞株    生殖系統(tǒng)    5x10^5    人絨毛膜癌細(xì)胞
KLE    人源化細(xì)胞株    生殖系統(tǒng)    5x10^5    人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
OVCAR-3    人源化細(xì)胞株    生殖系統(tǒng)    5x10^5    人卵巢腺癌細(xì)胞
Siha    人源化細(xì)胞株    生殖系統(tǒng)    5x10^5    人子宮頸鱗癌細(xì)胞
SK-OV-3    人源化細(xì)胞株    生殖系統(tǒng)    5x10^5    人卵巢腺癌細(xì)胞
BEL-7404    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人肝癌細(xì)胞
BGC-823    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人胃腺癌細(xì)胞
BxPC-3    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人胰腺腺癌細(xì)胞
Caco-2    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
chang liver    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人張氏肝細(xì)胞
DLD-1    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
ECA109    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人食管癌細(xì)胞
HCCLM3    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
Hep G2    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人肝癌細(xì)胞
Hep-3B    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人肝癌細(xì)胞
HGC-27    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人胃癌細(xì)胞（未分化）
HIC-2    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人小腸癌細(xì)胞
HT-29    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
HuH-7    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人肝癌細(xì)胞
L-02（HL-7702)    人源化細(xì)胞株    消化系統(tǒng)    5x10^5    人正常肝細(xì)胞

上海澤葉生物科技有限公司是一家服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè)，主要為科研機(jī)構(gòu)、高校、院所及企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)研究提供所需要的科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)等。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、材料科學(xué)，通用試劑、藥物合成試劑、手性化合物、催化劑及配體、分析試劑、生物試劑，檢測(cè)試劑等等。
    澤葉生物事業(yè)朝氣蓬勃，公司坐落在松江區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地和龐大的倉儲(chǔ)物流中心，憑著一支富有創(chuàng)造天賦的專業(yè)團(tuán)隊(duì)，新技術(shù)、新產(chǎn)品層出不窮。目前，澤葉產(chǎn)品已達(dá)30000 多種，并呈持續(xù)增長態(tài)勢(shì)。旨在為科研事業(yè)和工業(yè)領(lǐng)域客戶提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。
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