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293F(人胚腎細(xì)胞)
英文名稱:293F細(xì)胞總訪問:1110
國產(chǎn)/進(jìn)口:進(jìn)口半年訪問:1
產(chǎn)地/品牌:ECACC產(chǎn)品類別:細(xì)胞生物學(xué)試劑
規(guī)       格:T-25 Flask 最后更新:2024-10-9
貨       號:EC-0544
CAS   號:
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293F(人胚腎細(xì)胞)實(shí)驗(yàn),每一個(gè)步驟都要無菌操作。從開始的準(zhǔn)備工作,槍頭,EP管,PBS等的高壓;做實(shí)驗(yàn)前紫外燈的照射,實(shí)驗(yàn)人員佩戴口罩帽子穿超凈隔離服;所用試劑如果是很多人一起用,最好分裝,培養(yǎng)基最多一次配制一百到二百毫升,以免污染后浪費(fèi)。不放心試劑的可以用小的培養(yǎng)皿驗(yàn)菌。剩下的就是操作的規(guī)范性了,如果 是剛開始做,在進(jìn)細(xì)胞間前應(yīng)該自己先把步驟捋一遍,保證心中有數(shù),不會手忙腳亂。操作時(shí)注意細(xì)節(jié),比如槍頭是否碰到不干凈的區(qū)域,立即換槍頭。不同細(xì)胞還要注意互相之間不能交叉的。

293F(人胚腎細(xì)胞)產(chǎn)品概述:

細(xì)胞名稱

293F(人胚腎細(xì)胞)

種屬

年齡(性別)

胚胎

 

組織來源

腎臟

 

生長特性

 

細(xì)胞形態(tài)

 

背景描述

 

生長培養(yǎng)基

DMEM高糖+10% FBS+1% P/S                                        

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

293F(人胚腎細(xì)胞)保種心得:

首先,細(xì)胞采購的運(yùn)輸形式一般分為兩種,一種是直接寄送凍存細(xì)胞,一種是復(fù)蘇后寄送活細(xì)胞。前者是由液氮中取出細(xì)胞凍存管,采用干冰運(yùn)輸;后者是將細(xì)胞復(fù)蘇至T-25培養(yǎng)瓶中,采用常溫運(yùn)輸。兩者各有優(yōu)缺點(diǎn),第一種方式的優(yōu)點(diǎn)是可以長途運(yùn)輸,因?yàn)榧?xì)胞在干冰中相對穩(wěn)定,一般可以保證數(shù)周之內(nèi)不影響細(xì)胞活性,但缺點(diǎn)是運(yùn)輸成本高,且細(xì)胞復(fù)蘇是很復(fù)雜的過程,如果細(xì)胞復(fù)蘇后狀態(tài)不佳,則很難界定是來源的問題還是復(fù)蘇操作的問題;而第二種方式的優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞收到后可以直接通過觀察來大體了解細(xì)胞狀態(tài),并且對運(yùn)輸?shù)囊笙鄬^低,缺點(diǎn)則是只適合短途運(yùn)輸,因?yàn)榧幢氵\(yùn)輸時(shí)培養(yǎng)基中不添加血清,細(xì)胞還是會不斷增殖,當(dāng)細(xì)胞長滿后,細(xì)胞的狀態(tài)會隨時(shí)間的增加而不斷變差。綜上,如果是從國外大型細(xì)胞庫采購,一般采用第一種方法,既能適應(yīng)長途運(yùn)輸,且大型細(xì)胞庫的凍存細(xì)胞質(zhì)量普遍較好,在良好的操作下復(fù)蘇成活率很高;如果是從國內(nèi)細(xì)胞庫采購,則一般采用第二種方法,方便收到細(xì)胞時(shí)能較好掌握細(xì)胞狀態(tài),并且降低運(yùn)輸成本。

293F(人胚腎細(xì)胞)分別針對兩種運(yùn)輸方式來談下對新細(xì)胞的處理過程:

對于直接寄送凍存細(xì)胞的情況,首先要檢查的就是細(xì)胞收到后是否有足量剩余干冰,如果干冰不足,或是已經(jīng)沒有干冰,則細(xì)胞狀態(tài)可能會收到影響,建議盡快復(fù)蘇;如果有足量干冰,建議先轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜,于第二天按正常流程復(fù)蘇,即37℃水浴鍋中快速融解,低速離心后去除含DMSO的凍存液,換入適合細(xì)胞的新鮮培養(yǎng)基,輕柔吹勻后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中,補(bǔ)足培養(yǎng)基;一般貼壁細(xì)胞在24h內(nèi)即可觀察到細(xì)胞貼壁,從而判斷細(xì)胞狀態(tài),懸浮細(xì)胞則復(fù)蘇后即可觀察細(xì)胞狀態(tài)。對于凍存時(shí)間較長的細(xì)胞,可能需要傳代1到2次后,細(xì)胞才會調(diào)整到正常狀態(tài),所以細(xì)胞復(fù)蘇后如果狀態(tài)不佳,不要灰心,仍要細(xì)心培養(yǎng)。

對于復(fù)蘇后寄送活細(xì)胞的情況,則細(xì)胞收到后要先檢查細(xì)胞瓶是否有破損,細(xì)胞瓶在運(yùn)輸中很有可能受到碰撞和擠壓,導(dǎo)致瓶體受損。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞瓶受損,則需要盡快處理,該棄就棄。如果細(xì)胞瓶完好,則用酒精消毒瓶身,去除封口膜,然后置于37℃培養(yǎng)箱中靜置1-2h。待細(xì)胞穩(wěn)定后,觀察細(xì)胞狀態(tài),并及時(shí)記錄,因?yàn)楹芏鄧鴥?nèi)細(xì)胞庫都是可以反饋細(xì)胞狀態(tài)的,如果收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)不佳甚至污染,是可以要求重新寄送的。細(xì)胞如沒有異常,則盡快傳代并更換適合細(xì)胞的新鮮培養(yǎng)基。由于新細(xì)胞一般都是第一次接觸,細(xì)胞傳代過程中尤為需要注意胰酶消化時(shí)間,消化時(shí)間過短或過長都會影響細(xì)胞狀態(tài),甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。我建議大家采用低濃度胰酶消化,消化時(shí)縮短放培養(yǎng)箱和觀察的間隔時(shí)間,以便盡可能找到合適的消化時(shí)間。

293F(人胚腎細(xì)胞)本季度細(xì)胞銷售產(chǎn)品列表:

EC330    MUTZ-3     人急性非淋巴白血病細(xì)胞    人    IMDM    懸浮
EC353    TGBC11TKB    人胃癌細(xì)胞    人    F12    貼壁
EC349    HCEC-B4G12    人角膜內(nèi)皮細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC336    FRTL-5    大鼠甲狀腺細(xì)胞    大鼠    L15    貼壁
EC327    MCA38    小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞    小鼠    F12    貼壁
EC337    SMC-1    人胸膜間皮瘤細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC347    MEC-1    人粘液表皮樣癌細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC338    Beas-2B    人正常肺上皮細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
    HOEC    人口腔上皮    人    無    
EC339    HGF-1    人牙齦成纖維細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
    HC-a    人關(guān)節(jié)骨細(xì)胞    人    無    
    GT1-1    小鼠垂體    小鼠    無    
    MMQ    大鼠垂體    大鼠    無    
    SM9    胎盤細(xì)胞        無    
EC371    HKF    人成纖維細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC343    CCC-HSF-1    人皮膚纖維細(xì)胞    人    EMEM    貼壁
EC344    TU686    人喉癌細(xì)胞    人    IMDM    貼壁
EC351    MKN1    人胃癌細(xì)胞    人    1640    貼壁

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