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銷售商: 武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人MCSF抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的人MCSF與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人MCSF抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素?谷薓CSF抗體與結(jié)合在包被抗體上的人MCSF結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,人MCSF濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中人MCSF的濃度。
試劑盒組成
中文名稱 |
英文名稱 |
規(guī)格 |
保存 |
ELISA酶標板(可拆卸) |
Micro ELISA Plate(Dismountable) |
8×12 / 8×6* |
4℃/-20℃ # |
凍干標準品 |
Reference Standard |
2/1 支* |
4℃/-20℃ # |
標準品&樣品稀釋液 |
Reference Standard & Sample Diluent |
1瓶 20mL/12mL* |
4℃ |
濃縮生物素化抗體 |
Concentrated Biotinylated Detection Ab |
1支 120μL/70μL* |
4℃/-20℃ # |
生物素化抗體稀釋液 |
Biotinytated Detection Ab Diluent |
1瓶 10mL/6mL* |
4℃ |
濃縮HRP酶結(jié)合物 |
Concentrated HRP Conjugate |
1支 120μL/70μL* |
4℃(避光) |
酶結(jié)合物稀釋液 |
HRP Conjugate Diluent |
1瓶 10mL/6mL* |
4℃ |
濃縮洗滌液(25×) |
Concentrated Wash Buffer (25×) |
1瓶 30mL/16mL* |
4℃ |
底物溶液(TMB) |
Substrate Reagent |
1瓶 10mL/6mL* |
4℃(避光) |
反應終止液 |
Stop Solution |
1瓶 10mL/6mL* |
4℃ |
封板覆膜 |
Plate Sealer |
5/3 張* |
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產(chǎn)品說明書 |
Product Description |
1 份 |
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質(zhì)檢報告 |
Certificate of Analysis |
1 份 |
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特別說明: |
樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
具體處理方法可參考:http://www.elabscience.cn/index.php/resources/view/aid/17671.jsp
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品最高值,請根據(jù)實際情況,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數(shù))。
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
結(jié)果判斷:
1.以標準品的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標,標準品的濃度為縱坐標,繪出標準曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數(shù)。
更多詳情;請點擊官網(wǎng): http://www.elabscience.cn