DNA pull down技術(shù)概述-輝駿生物

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DNA pull down-MS是體外研究DNA與蛋白互作的有力工具。該技術(shù)將生物素標(biāo)記的DNA片段結(jié)合在鏈霉親和素磁珠上，再與細(xì)胞核蛋白孵育，純化出與DNA片段互作的蛋白，洗滌洗脫得到的蛋白產(chǎn)物，做western-blot檢測(cè)特定蛋白是否與靶DNA片段結(jié)合；做質(zhì)譜鑒定即可篩選出與DNA片段可能互作的蛋白信息（如具體某個(gè)或某些轉(zhuǎn)錄因子/組蛋白等）。

DNA pulldown技術(shù)原理-輝駿生物

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生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強(qiáng)度最高的非共價(jià)作用；其中活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)。因此用生物素標(biāo)記核酸后，利用生物素和鏈霉親和素之間的親和作用，可以純化出各種生物大分子復(fù)合物。
       
DNA pull down實(shí)驗(yàn)首先針對(duì)靶標(biāo)區(qū)域設(shè)計(jì)DNA探針，探針經(jīng)過脫硫生物素標(biāo)記，跟偶聯(lián)在磁珠上的鏈霉親和素結(jié)合；細(xì)胞核提取物與磁珠-DNA探針孵育，純化出與靶DNA片段結(jié)合的蛋白復(fù)合體，洗脫得到DNA片段的結(jié)合蛋白質(zhì)。
 
DNA pulldown技術(shù)應(yīng)用-輝駿生物

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目的DNA片段的互作蛋白（如轉(zhuǎn)錄因子等）篩選。


DNA Pull down技術(shù)服務(wù)參考文獻(xiàn)

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1.A requirement for breast-cancer-associated gene 1 (BRCA1) in the spindle checkpoint. Proc Natl AcadSci U S A 101(49):17108-17113(2004).
       
2.Identification of DNA-binding proteins that interact with the 5'-flanking region of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry. J Pharm Biomed Anal 116:94-100(2015).


DNA pull-down實(shí)驗(yàn)活動(dòng)聲明-輝駿生物

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1、活動(dòng)時(shí)間：2019.02.22—2019.03.22；非活動(dòng)期間項(xiàng)目不享受相關(guān)優(yōu)惠；
2、本活動(dòng)最終解釋權(quán)歸廣州輝駿生物科技有限公司所有。

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       廣州輝駿生物科技股份有限公司（原“廣州輝駿生物科技有限公司”）成立于2008年，是一家為科研機(jī)構(gòu)提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)的專業(yè)公司，尤其擅長(zhǎng)于蛋白質(zhì)組學(xué)和分子生物學(xué)等技術(shù)。經(jīng)過10多的不斷努力與開拓進(jìn)取，隨著公司規(guī)模不斷擴(kuò)大，總部已經(jīng)成功入駐廣州黃埔區(qū)科學(xué)城國(guó)家級(jí)科技企業(yè)孵化器。
 

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