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細(xì)胞介紹
細(xì)胞來源于日本人的腎臟腫瘤細(xì)胞，可以移植到裸鼠。
細(xì)胞特性
1） 來源：腎
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 細(xì)胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備RPMI-1640（推薦iCell-0002）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
下面T25瓶為例；
1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細(xì)胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話：021-60523091，我們隨時給予解答。
賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：
一、原代細(xì)胞服務(wù)
各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源；
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源；
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等；
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù)；
二、細(xì)胞株/系服務(wù)
細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書；
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)；
細(xì)胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等；
三、iPS細(xì)胞
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）；
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存；
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí)；
新藥及實驗儀器上市前評估；
四、技術(shù)外包服務(wù)：各類細(xì)胞生物學(xué)實驗、分子生物學(xué)實驗、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等
賽百慷( 上海 )生物技術(shù)股份有限公司( iCell Bioscience Inc，Shanghai )是一家專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)原代細(xì)胞、細(xì)胞系、干細(xì)胞以及相關(guān)生物學(xué)試劑，并提供專業(yè)生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)外包的高新技術(shù)企業(yè)，公司總部位于上海。
iCell專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)的人體組織源及動物組織源的原代細(xì)胞、細(xì)胞系、iPS細(xì)胞等產(chǎn)品，提供以及相關(guān)的CRO，CMO服務(wù)，同時也為客戶提供相關(guān)培養(yǎng)體系，培養(yǎng)基等試劑。在中國，iCell除與中國科學(xué)院細(xì)胞庫合作外，還與各地醫(yī)學(xué)學(xué)院、機構(gòu)、藥企合作，其中包括:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院，復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)院。
目前，賽百慷已經(jīng)建立起國內(nèi)先進(jìn)完備的“人類組織源原代細(xì)胞庫和細(xì)胞系庫”兩大細(xì)胞資源庫，各種種屬源細(xì)胞株(系)500多種，原代細(xì)胞包括人源、鼠源、兔源、豬源、羊源以及其它動物源近700多種，3000多株現(xiàn)貨，引進(jìn)了生命科學(xué)領(lǐng)域的全套實驗設(shè)備，建立了先進(jìn)的生產(chǎn)研發(fā)實驗室，采用了國際先進(jìn)的行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、制造工藝、質(zhì)檢流程，保證了產(chǎn)品出廠的品質(zhì)，公司同時更注重產(chǎn)品售前與售后的技術(shù)服務(wù)，著重滿足客戶的需求與體驗。還申請了相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)試劑等十幾項專利產(chǎn)品。正是憑借獨有的原代細(xì)胞領(lǐng)域原創(chuàng)技術(shù)的優(yōu)勢，賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司，已經(jīng)成為國內(nèi)外眾多生物醫(yī)藥企業(yè)誠信的合作伙伴和堅強的技術(shù)后盾。
賽百慷公司已及iCell賽百慷人秉承著將細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)業(yè)化的良好愿望，多年來一直致力于科研誠信服務(wù)，每一株細(xì)胞都飽含著賽百慷對于科研嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臉O度追求。
電話：400-021-2021 021-61525181
網(wǎng)址：www.icellbioscience.com
