奧盛推出高通量測(cè)序NGS助手Feyond-F100熒光酶標(biāo)儀
瀏覽次數(shù):2701 發(fā)布日期:2024-3-27
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文庫(kù)的質(zhì)量對(duì)于高通量測(cè)序(NGS)產(chǎn)出的數(shù)據(jù)質(zhì)量至關(guān)重要,低估或高估文庫(kù)質(zhì)量都會(huì)嚴(yán)重影響測(cè)序的效果。目前,最常用的定量試劑,是以Picogreen為主要成分的熒光染料,當(dāng)其與DNA雙鏈結(jié)合后,才能發(fā)出熒光,且所產(chǎn)生的熒光在一定范圍內(nèi)與DNA濃度呈正比,從而起到對(duì)DNA樣本的精準(zhǔn)定量。
與這類試劑搭配最常見(jiàn)的儀器,應(yīng)是熒光計(jì)和熒光酶標(biāo)儀。常見(jiàn)的熒光計(jì)有Thermo的Qubit4和Qubit Flex,還有奧盛自有產(chǎn)品Fluo-200和Fluo-800,但熒光計(jì)的通量較少,最多只能做到8通道,若要同時(shí)進(jìn)行8通道的樣品檢測(cè),還需同時(shí)進(jìn)行8通道的標(biāo)品校準(zhǔn),非常浪費(fèi)試劑。而選用熒光酶標(biāo)儀作為檢測(cè)工具時(shí),雖然檢測(cè)通量有所增大,但面臨著標(biāo)準(zhǔn)曲線建立的問(wèn)題,由于熒光染料受環(huán)境的影響較大,因此在每次進(jìn)行樣品檢測(cè)時(shí),都需要重新建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,若標(biāo)曲線性不夠理想,還需重新配制標(biāo)曲,增加實(shí)驗(yàn)負(fù)擔(dān)。
奧盛3月份推出的Feyond-F100熒光酶標(biāo)儀不僅可進(jìn)行常規(guī)的細(xì)胞活性、GFP、RFP、ORAC、Ca2+流分析等熒光實(shí)驗(yàn),新增的定量檢測(cè)功能集熒光計(jì)的便利與酶標(biāo)儀的高通量于一身,無(wú)需建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,僅需校準(zhǔn)標(biāo)品點(diǎn),即可實(shí)現(xiàn)96個(gè)樣品的精確定量,最低檢出限達(dá)0.1ng/uL(10uL樣本量);該款熒光酶標(biāo)儀3月22日已上市。
特色功能
除常規(guī)熒光檢測(cè)外,新增定量模式
圖1 Feyond-F100主界面圖
僅需布局兩個(gè)標(biāo)品點(diǎn),即可完成曲線校準(zhǔn)
圖2 標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)界面
內(nèi)置標(biāo)曲,調(diào)用即可,也可自行建立曲線保存
圖3 標(biāo)準(zhǔn)曲線界面
僅需輸入樣品體積,檢測(cè)結(jié)果一目了然
圖4 結(jié)果顯示界面
性能優(yōu)異
標(biāo)品性能驗(yàn)證
將10ng/uL標(biāo)品梯度稀釋成8、6、4、2、1、0.4、0.2ng/uL。樣本量為1uL或10uL時(shí),F(xiàn)eyond-F100與Q的偏差均在10%以內(nèi)。
表1 標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果
體積 |
樣品類型 |
Q定量 |
Feyond-F100 |
差值 |
偏差 |
10 |
標(biāo)品 |
0.189 |
0.1941 |
-0.0051 |
-2.7% |
10 |
標(biāo)品 |
0.378 |
0.3854 |
-0.0074 |
-2.0% |
10 |
標(biāo)品 |
0.982 |
0.9739 |
0.0081 |
0.8% |
10 |
標(biāo)品 |
1.93 |
1.9675 |
-0.0375 |
-1.9% |
10 |
標(biāo)品 |
4 |
4.0883 |
-0.0883 |
-2.2% |
10 |
標(biāo)品 |
5.94 |
6.0796 |
-0.1396 |
-2.4% |
10 |
標(biāo)品 |
7.78 |
7.8077 |
-0.0277 |
-0.4% |
10 |
標(biāo)品 |
10.2 |
10.0803 |
0.1197 |
1.2% |
1 |
標(biāo)品 |
1.03 |
1.095 |
-0.065 |
-6.3% |
1 |
標(biāo)品 |
1.92 |
1.997 |
-0.077 |
-4.0% |
1 |
標(biāo)品 |
4.1 |
4.12 |
-0.02 |
-0.5% |
1 |
標(biāo)品 |
6.18 |
6.043 |
0.137 |
2.2% |
1 |
標(biāo)品 |
8.14 |
7.895 |
0.245 |
3.0% |
1 |
標(biāo)品 |
10.5 |
10.059 |
0.441 |
4.2% |
文庫(kù)及核酸定量
在測(cè)試文庫(kù)樣本及cfDNA樣本時(shí),F(xiàn)eyond-F100與Q的偏差也可在10%以內(nèi)。
表2 樣品檢測(cè)結(jié)果
體積 |
樣品類型 |
Q定量 |
Feyond-F100 |
差值 |
偏差 |
1 |
文庫(kù) |
104 |
105.079 |
-1.079 |
-1.0% |
1 |
文庫(kù) |
74.2 |
74.102 |
0.098 |
0.1% |
1 |
文庫(kù) |
77.4 |
75.628 |
1.772 |
2.3% |
1 |
文庫(kù) |
22.6 |
22.245 |
0.355 |
1.6% |
1 |
文庫(kù) |
Out of range |
148.53 |
/ |
/ |
1 |
文庫(kù) |
52.4 |
53.455 |
-1.055 |
-2.0% |
1 |
文庫(kù) |
84.6 |
87.402 |
-2.802 |
-3.3% |
1 |
文庫(kù) |
11.5 |
10.8 |
0.7 |
6.1% |
2 |
cfDNA |
0.456 |
0.482 |
-0.026 |
-5.7% |
2 |
cfDNA |
1.27 |
1.287 |
-0.017 |
-1.3% |
2 |
cfDNA |
0.625 |
0.622 |
0.003 |
0.5% |
2 |
cfDNA |
0.758 |
0.794 |
-0.036 |
-4.7% |
2 |
cfDNA |
1.45 |
1.522 |
-0.072 |
-5.0% |
2 |
cfDNA |
1.48 |
1.542 |
-0.062 |
-4.2% |
注:上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)源奧盛實(shí)驗(yàn)室
關(guān)于奧盛
奧盛定位生命科學(xué)工具提供商,專注生命科學(xué)檢測(cè)設(shè)備及自動(dòng)化解決方案。公司圍繞生物樣品核酸蛋白純化、自動(dòng)化工作站,生物吸收光、熒光及發(fā)光檢測(cè)三大技術(shù)平臺(tái),在生命科學(xué)領(lǐng)域進(jìn)行了深度布局。
目前,公司擁有省級(jí)高新技術(shù)企業(yè)研究院,是2022年第一批浙江省”專精特新”中小企業(yè)。