最近感覺被導(dǎo)師針對了

發(fā)郵件不回……
發(fā)微信不回……
實(shí)驗(yàn)室里碰到……

我說「老師早」，他回「嗯哼」

上一次聯(lián)系導(dǎo)師，是由于自己的課題需要訂購一批基因敲除小鼠，金額老大了。為了不出差錯，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了一兩周，提交小鼠訂購清單前發(fā)郵件征詢導(dǎo)師的同意，但一個禮拜過去了，他還沒回復(fù)。導(dǎo)師（nanren）的心海底針，我決定與他當(dāng)面對峙。

老師，我那個課題用的基因敲除小鼠可以下單嗎？
那你說為什么訂的KO小鼠，不是說訂CKO小鼠嗎？

這兩種小鼠有區(qū)別嗎？應(yīng)該沒啥影響吧。
你有依據(jù)嗎？最基本的文獻(xiàn)都不看，就隨便訂小鼠？按這樣這個課題申請下來的國自然都支撐不了你發(fā)一篇論文。你研究的是胚胎致死性基因，不能用KO小鼠。CKO小鼠模型可以提供時空特異性的基因敲除，可以提供細(xì)節(jié)更豐富、證據(jù)更確鑿的研究數(shù)據(jù)。沒想清楚之前別找我要錢！

本以為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)很充分了，結(jié)果是小鼠選錯了。可是KO還是CKO小鼠？確實(shí)從一開始就沒注意這個問題。查了文獻(xiàn)資料，才了解到KO和CKO小鼠，二者在成本、制作周期、建系難度上都有著不小的差別。那到底該如何選擇呢？
 

全身性基因敲除KO

全身性基因敲除KO（Knockout），是指在小鼠所有組織細(xì)胞中，將靶基因的某些重要外顯子或功能結(jié)構(gòu)域、甚至所有外顯子敲除掉，導(dǎo)致靶基因的表達(dá)缺失。

優(yōu)勢：
1、小鼠模型構(gòu)建周期短；
2、交配流程簡單。

劣勢：
1、大約有1/3的基因純合敲除后會導(dǎo)致小鼠胚胎期死亡或出生期死亡；
2、引發(fā)其它基因的代償，導(dǎo)致基因敲除后沒有明顯表型改變。

主要應(yīng)用：
研究目的基因?qū)θ�身生理或病理的功能�?/span>
 

條件性基因敲除CKO

條件性基因敲除CKO（Conditional Knockout），將某個基因的修飾限制于小鼠某些特定類型的細(xì)胞或發(fā)育的某一特定階段，實(shí)現(xiàn)對小鼠基因組的時空特異性修飾。

優(yōu)勢：
1、多功能的基因敲除模型，可與不同工具鼠靈活搭配使用，客觀而系統(tǒng)地研究目的基因；
2、基因在不同組織器官發(fā)生、發(fā)育或疾病發(fā)生、治療過程中的作用與機(jī)制；
3、克服了重要基因完全敲除后的胚胎致死或過早死亡。

劣勢：
1、交配流程較為復(fù)雜；
2、小鼠模型構(gòu)建周期相對較長。

主要應(yīng)用：
1、胚胎致死性基因的研究；
2、研究靶基因在特定組織或細(xì)胞中的功能；
3、研究靶基因在特定時期或階段發(fā)揮的作用。

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