IL4（interleukin 4）該基因編碼的蛋白質(zhì)是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的多效細(xì)胞因子。IL4能夠結(jié)合其受體IL4Ra，對(duì)B細(xì)胞，T細(xì)胞，肥大細(xì)胞，巨噬細(xì)胞等具有免疫調(diào)節(jié)作用。IL4在哮喘模型中能夠誘導(dǎo)B細(xì)胞合成大量IgE，招募嗜酸性粒細(xì)胞募集，增強(qiáng)ASM收縮，促進(jìn)氣道重塑等過(guò)程^[1]。

IL4RA（interleukin 4 receptor α）該基因編碼IL4受體的α鏈，屬于I型跨膜蛋白，在免疫反應(yīng)中起著重要作用。IL4R可以與IL4和IL13結(jié)合以調(diào)節(jié)IgE的產(chǎn)生，并且與IL4的結(jié)合可以促進(jìn)Th2細(xì)胞的分化，從而誘導(dǎo)哮喘的發(fā)生^[2]。

因此，IL4和IL4R的拮抗劑可降低體內(nèi)IL4的水平，并可對(duì)哮喘患者發(fā)揮抗炎和抗免疫作用。IL4和IL4R被認(rèn)為是治療過(guò)敏和哮喘的明星靶標(biāo)。

藥物研發(fā)現(xiàn)狀

Dupixent（dupilumab）是Sanofi和Regeneron推出的靶向IL-4/IL-13的抗體藥物，其研發(fā)進(jìn)展也是走在世界前列。

百奧賽圖B-hIL4/hIL4RA 小鼠哮喘模型小鼠

——助力藥物研發(fā)


 

百奧賽圖B-hIL4/hIL4RA小鼠

蛋白表達(dá)分析
 

1. 小鼠血清中hIL4表達(dá)檢測(cè)

ELISA分析C57BL/6和純合B-hIL4/hIL4RA小鼠血清中IL4蛋白表達(dá)

結(jié)果顯示：在C57BL/6小鼠血清中可檢測(cè)到mIL4蛋白表達(dá)，B-hIL4/hIL4RA小鼠血清中可檢測(cè)到hIL4蛋白表達(dá)。

2. 小鼠脾細(xì)胞中hIL4RA表達(dá)檢測(cè)
 

B-hIL4/hIL4RA人源化小鼠脾細(xì)胞活化及流式檢測(cè)

結(jié)果顯示：在C57BL/6小鼠中可檢測(cè)到mIL4RA⁺細(xì)胞。在B-hIL4/hIL4RA純合鼠中，可檢測(cè)到hIL4RA⁺細(xì)胞。

基于B-hIL4/hIL4RA小鼠

hIL4RA Ab 藥效評(píng)估

1. 哮喘模型藥效評(píng)估方案
 

2. 小鼠哮喘模型肺泡灌洗液（BALF）中免疫細(xì)胞分析
 

BALF（ Bronchoalveolar Lavage Fluid ）炎性細(xì)胞分析結(jié)果顯示，Dupixent Analog給藥組炎性反應(yīng)明顯減緩。

3. 小鼠哮喘模型血清中IgE檢測(cè)
 

實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)收集小鼠血清樣本，檢測(cè)分析IgE水平。再利用Dupixent Analog處理后，與陽(yáng)性對(duì)照相比給藥組IgE水平明顯降低。

基于B-hIL4/hIL4RA小鼠

哮喘模型建立及H&E染色

H&E 染色

B-hIL4/hIL4RA小鼠建立哮喘模型后進(jìn)行肺組織H&E染色。結(jié)果顯示相對(duì)于PBS對(duì)照組，哮喘陽(yáng)性組表現(xiàn)出明顯的斑片狀支氣管周?chē)�炎性浸�?rùn)，主要由嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞組成。

總結(jié)

1、百奧賽圖B-hIL4/hIL4RA純合小鼠能夠表達(dá)人源IL4和IL4RA蛋白；

2、百奧賽圖已經(jīng)建立了穩(wěn)定的哮喘模型，并基于B-hIL4/hIL4RA小鼠能夠有效評(píng)價(jià)人源IL4RA抗體藥效。

參考文獻(xiàn)

1.Vatrella A，et al.,Dupilumab: a novel treatment for asthma.J Asthma Allergy. 2014 Sep 4;7:123-30.

2. Gandhi, Namita A., et al. Targeting key proximal drivers of type 2 inflammation in disease. Nature Reviews Drug Discovery 15.1 (2016): 35-50. 

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