Nature Methods推薦PCR污染清除方法——德國PanReac AppliChem DNA-ExitusPlus (Cat.No. A7089)
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)簡稱PCR,是一種選擇性體外擴增核酸片段的方法,經(jīng)過循環(huán)復制,擴增產(chǎn)量是指數(shù)上升,所以具有極高的靈敏度,被廣泛應用于生物和醫(yī)學的科研,臨床各種研究中,是目前應用最為廣泛的分子生物學方法之一。
但也正是由于PCR具有極高的靈敏度,微量的核酸污染便會導致假陽性擴增結果而導致實驗結果不準確,這也是廣大實驗者最頭痛的問題,如果形成氣溶膠污染擴散,則可引起整個PCR實驗室的污染,處理起來非常棘手,嚴重的甚至要關閉實驗室。環(huán)境中的核酸是主要的污染源,常見的污染源有:
1. 模板提取時真空抽干裝置
2. 超凈臺
3. 電泳裝置
4. 紫外分析儀
5. 剪刀、鑷子、刀片、移液器等器械
6. 離心機
7. 冰箱門把手,冷凍架,門把手或實驗臺面等
8. 氣溶膠
9. 高壓滅菌裝置
傳統(tǒng)的PCR污染清除方法主要有:稀酸處理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法、酶解變性、酒精沉淀等幾種方式,但仍然存在無法徹底破壞DNA分子、試劑具有腐蝕性或者毒性、小片段核酸無法清除等不足。
德國AppliChem獨家研發(fā)的DNA-ExitusPlus是一種無腐蝕、無致癌性的核酸污染清除溶液,現(xiàn)貨8折促銷,該產(chǎn)品可將裸露的核酸完全降解至無法作為擴增模板的小片段,無法被擴增,且無法恢復,從而徹底消除了PCR過程中由于環(huán)境污染而導致的假陽性擴增。
DNA-ExitusPlusTM特點:
1. 產(chǎn)品為非酶類試劑;
2. 產(chǎn)品中各組分協(xié)同作用,快速、非序列特異性的降解核酸污染;
3. 所有組分可生物降解、無毒無害;
4. 不含有機溶劑或者揮發(fā)性物質,不含無機酸或者堿性物質,不會對金屬形成腐蝕;
5. 使用簡單,噴灑或浸泡處理15分鐘即可完成清除作用;
6. 升溫至50度可提高反應速度。