缺血再灌注損傷(IRI)往往與致命性疾病相關(guān)聯(lián),如腦缺血,中風(fēng)、心肌梗塞和癌癥等疾病都能引起供血受阻,從而導(dǎo)致氧氣(O2)和營養(yǎng)供應(yīng)減少,引起細(xì)胞損傷;而富氧血液流通恢復(fù)后,過多活性氧,所引起的細(xì)胞損傷,比氧氣和營養(yǎng)缺乏更為嚴(yán)重。缺血再灌注損傷早已成為臨床醫(yī)學(xué)不可忽視的研究問題。
以往針對IRI的研究,更多采用小鼠模型來做。然而針對相關(guān)分子機(jī)制問題,同時(shí)建立體外細(xì)胞IRI模型也已成為不可或缺的研究工具,如針對腦缺血和心肌缺血研究建立的IRI模型。傳統(tǒng)IRI模型研究方法:
小鼠模型:操作繁瑣,通量低,無法在分子細(xì)胞生物學(xué)層面研究
細(xì)胞模型:通常需要手動(dòng)密封或開放細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境,或者通過酶反應(yīng)降低氧含量,來模擬IRI氣體環(huán)境
這些方法不僅在氧氣控制方式上不夠精確,更無法實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測氧氣真實(shí)濃度及檢測IRI模型構(gòu)建效果,并且無法實(shí)時(shí)對各項(xiàng)代謝相關(guān)生理指標(biāo)進(jìn)行同時(shí)檢測。
德國BMG公司全新氣體濃度調(diào)控模塊(ACU),首次在高靈敏度,高靈活性多功能酶標(biāo)儀CLARIOstar上滿足IRI模型氣體環(huán)境調(diào)控要求。配備ACU的CLARIOstar不僅能夠提供穩(wěn)定的O2和CO2 分壓,還可唯一實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化的快速缺氧及復(fù)氧。全新的ACU可實(shí)現(xiàn)O2和CO2分壓獨(dú)立,自動(dòng),程序化調(diào)控?稍诒3諧O2分壓穩(wěn)定下,快速創(chuàng)造缺氧環(huán)境,任意可調(diào)低氧維持時(shí)間,之后更是唯一可實(shí)現(xiàn)超快速復(fù)氧(如圖1所示,30min以內(nèi)就可從低氧恢復(fù)到環(huán)境氧)。
圖1,CLARIOstar ACU模擬IRI氣體環(huán)境
這種通過在多功能酶標(biāo)儀中構(gòu)建諸如缺氧再灌注或腫瘤缺氧狀態(tài)等疾病模型的強(qiáng)大功能,對活細(xì)胞體外研究可提供極大幫助。結(jié)合CLARIOstar其他高靈敏度多功能模塊同時(shí)運(yùn)行特色,CLARIOstar-ACU為在分子細(xì)胞層面進(jìn)行IRI機(jī)制研究,多參數(shù)同時(shí)監(jiān)測(胞內(nèi)氧含量,鈣波動(dòng),膜電位,或活性氧,細(xì)胞增值和細(xì)胞凋亡等相關(guān)指標(biāo);如圖2所示,胞內(nèi)氧,活性氧和膜電位,在氣體模擬缺血再灌注條件下,多參數(shù)同步實(shí)時(shí)監(jiān)測),IRI高通量藥物篩選提供了最理想的 研究工具。
圖2,IRI模擬條件下,胞內(nèi)氧,活性氧和膜電位多參數(shù)同步實(shí)時(shí)監(jiān)測
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