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TwistDx液態(tài)重組酶聚合酶擴增 (RPA) 試劑正式上市

瀏覽次數(shù):11848 發(fā)布日期:2017-7-18  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請注明出處
近期,TwistDx推出了一系列全新的液態(tài)重組酶聚合酶擴增 (RPA)試劑盒,這些試劑盒非常適合需要不使用熱循環(huán)儀就能在15分鐘內(nèi)完成 DNA/RNA 擴增的實驗室以及想要靈活構(gòu)建試驗體系的研究人員使用。
 
 
TwistAmp® Liquid試劑盒提供經(jīng)甘油穩(wěn)定化處理的液態(tài)RPA試劑,該形態(tài)對于在實驗室執(zhí)行 PCR 和其他基于酶的反應(yīng)的任何人來說都非常熟悉。這些試劑各自裝于單獨的試管中,用戶可隨意從中移取任何量的酶混合液來構(gòu)建自己所選的RPA反應(yīng)體積,配制用于多次反應(yīng)的預(yù)混液,或者以各種 RPA 組分比例進行實驗以優(yōu)化試驗。
 
除了具有室溫穩(wěn)定性的凍干態(tài)TwistAmp® RPA試劑盒這一旗艦產(chǎn)品,本次新推出的 TwistAmp® Liquid試劑盒是現(xiàn)場或定點試驗開發(fā)的理想之選。液體形態(tài)讓實驗室更容易地在日常工作中使用快速簡單的RPA法(該方法有時甚至采用與PCR相同的引物)取代 PCR法,以及更容易地開發(fā)出定制的試驗。
 
產(chǎn)品組成:
TwistAmp Basic Kit(凍干態(tài))
TwistAmp Basic Kit(液態(tài)) NEW!!!
 96 freeze-dried RPA pellets
 4 x 1 ml TwistAmp® Rehydration buffer
 1 x 250µl magnesium acetate (280mM)
 6µl of Control template
 45µl of Control primer mix
 50µl 20x Core Reaction Mix
 3ml 2 x Reaction Buffer
 500µl 280mM MgOAc
 550µl 10 x E-mix
 100µl of Positive control template
 45µl of Positive control oligo mix  
 
 
相關(guān)擴展試劑盒額外提供試劑:
 100 µl 50x 外切酶 III (TwistAmp® Liquid exo/exo RT kits);
 100 µl 50x 逆轉(zhuǎn)錄酶 (RT) (TwistAmp® Liquid Basic RT/exo RT kits);
 100 µl of 陽性對照模板 (DNA with TwistAmp® Liquid exo/Basic kits, RNA with TwistAmp® Liquid Basic RT/exo RT kits);
 45 µl of 陽性oligo mix (oligo mix consists of primers for Basic/Basic RT kits, primers plus a fluorescently labelled exo probe in the exo/exo RT kits)
其他必需試劑(非試劑盒提供):
 ddH2O; dNTPs; 寡聚核苷酸; RNase抑制劑(僅用于RT試劑盒)
 
產(chǎn)品信息:
貨號
品名
規(guī)格
TALQBAS01
TwistAmp Liquid Basic Kit
100 rxn以上
TALQBASRT01
TwistAmp Liquid Basic RT Kit
100 rxn以上
TALQEXO01
TwistAmp Liquid Exo Kit
100 rxn以上
TALQEXORT01
TwistAmp Liquid Exo RT Kit
100 rxn以上
 
附: TwistAmp liquid試劑盒Q&A
Q 20x核心反應(yīng)mix有沉淀,是否影響其功能?
A在低溫保存時, 重組酶和輔助蛋白在50%甘油中20x核心反應(yīng)mix中有時會發(fā)生可逆的共沉淀反應(yīng).所以在室溫融化混勻后離心使其返回溶液形式并不影響其功能。
Q 使用Liquid試劑盒做多重實驗,能否制備master mix?
A 可以。Oligos, 2x Reaction Buffer, water, dNTPs and 10x E-mix可以預(yù)先混合,置于冰上幾個小時,在很多實例中可以過夜保存(性能上有任何改變都需要客戶自行實驗和評價)。一旦加入20x核心酶,短期保存在冰上也是可以的。
Q 使用Liquid試劑盒如何提高重復(fù)率和RNA模板的擴增率?
A 先將RNA模板和醋酸鎂混合后加入反應(yīng)體系中,RNA的三級結(jié)構(gòu)會抑制逆轉(zhuǎn)錄酶的活性,所以加入RNA和醋酸鎂時,將兩者分別加到在管內(nèi)壁兩側(cè)或者將醋酸酶加在管內(nèi)蓋中,同時離心混入體系,這種操作會提高反應(yīng)性能。
Q 在TwistAmp Liquid E-mix中有沉淀,還能使用嗎?
A 可以。少量磷酸肌酸會發(fā)生沉淀不會影響RPA反應(yīng),只需在實驗前通過渦旋將沉淀重懸離心即可。
Q 在使用Liquid試劑盒時,是否能夠使用dUTP/生物素(酰)化dUTP?
A 可以,請參考
Q 最小的RPA液體反應(yīng)體系是多少?
A 最小低至PL級,請參考
Q 液體反應(yīng)體系中需要加入多少dNTPs?
A 1.8mM(總)dNTPs 作為起始量即可。用戶也可以根據(jù)自身實驗優(yōu)化濃度,有時1-12mM均適用。
Q 如何提高擴增曲線的可重復(fù)性?
A 優(yōu)化擴增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數(shù)模板,不穩(wěn)定擴增可能是因為達到檢測限或者是反應(yīng)混勻程度不同(未混勻的反應(yīng)擴增效率不佳)。另外,在低溫情況下存貯,重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴增的原因。所以,20x核心反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體,不影響其功能,并且有效提高擴增效率。不穩(wěn)定擴增也可能是因為master mix量不足,在加入體系前,用戶必須保證震蕩后20x核心反應(yīng)組分均一。
相關(guān)公司:默瑞(上海)生物科技有限公司
聯(lián)系電話:4006-400-850
E-mail:info@moreybio.com


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