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中國第一臺CyTOF 2質譜流式細胞儀震撼亮相廈門大學

瀏覽次數(shù):19062 發(fā)布日期:2014-3-19  來源:本站 本站原創(chuàng),轉載請注明出處

2014年3月18日,這是一個值得紀念的日子,廈門大學校園內春意盎然,綠草如茵,年輕的學子們歡快的奔跑著,此時廈門大學細胞應激生物學國家重點實驗室也在發(fā)生著一件令各位教授興奮的事情---中國首臺CyTOF 2質譜流式細胞儀正式安裝調試中。來自美國DVS Science公司工程師Foroz Alam、北京東勝創(chuàng)新生物科技有限公司分子影像部CyTOF工程師陳曉安、陳新蕾親臨現(xiàn)場指導安裝。


廈門大學細胞應激生物學國家重點實驗室


中國第一臺CyTOF 2質譜流式細胞儀


美國DVS Science公司工程師Foroz Alam(中)
北京東勝創(chuàng)新生物科技有限公司分子影像部CyTOF工程師陳曉安(右)、陳新蕾(左)


兩國工程師技術交流中

質譜流式細胞技術目前在國內可以說是一項領先技術,由北京東勝創(chuàng)新率先由美國引進且目前唯一擁有,此項技術利用質譜原理對單細胞進行多參數(shù)檢測的流式技術。它繼承了傳統(tǒng)流式細胞儀的高速分析的特點,又具有質譜檢測的高分辨能力,是流式細胞技術一個新的發(fā)展方向。

傳統(tǒng)的流式技術主要基于對熒光發(fā)射光譜的檢測,但是熒光基團發(fā)射光譜一般比較寬,其間往往會發(fā)生重疊。一方面限制了檢測通道的數(shù)量(<20個);另一方面,它會帶來嚴重的串色問題,很多通道的信號需要復雜的補償計算。


和傳統(tǒng)熒光流式檢測的熒光發(fā)射信號相比,質譜流式細胞儀的信號有了質的飛躍。


為了解決這些問題,質譜流式技術應運而生。與傳統(tǒng)流式細胞技術相比,其主要有兩點改進:第一、標簽系統(tǒng)的不同,前者主要使用各種熒光基團作為抗體的標簽,后者則使用各種金屬元素作為標簽;第二、檢測系統(tǒng)的不同,前者使用激光器和光電倍增管作為檢測手段,而后者使用ICP質譜技術作為檢測手段。通過這些改進,質譜流式技術巧妙的實現(xiàn)了更多參數(shù)的檢測。

 


用金屬標簽抗體標記的細胞進入質譜流式細胞儀后,依次通過ICP質譜檢測裝置,然后對每個細胞中各種金屬標簽進行定量檢測,從而得到每個細胞中各目標蛋白的含量。
 

技術特點:
由于利用ICP質譜作為檢測手段,與傳統(tǒng)流式細胞技術相比,質譜流式細胞技術具有以下特點:

第一、通道數(shù)量增加到上百個
質譜流式細胞儀中的ICP質譜裝置具有非常寬的原子量檢測范圍(88~210Da),因此可以對單個細胞同時檢測上百個不同的參數(shù)。

第二、通道間無干擾,無需計算補償
ICP質譜具有超高的分辨能力,可以完全區(qū)分用來標記的各種元素。實驗數(shù)據(jù)表明,相鄰通道間的干擾<0.3%,基本可以忽略不計,無需計算補償。這樣不僅使實驗流程得到簡化,也節(jié)約了標本和試劑。

第三、金屬標簽數(shù)量多,并具有極低的背景
用來作為標簽的金屬元素在細胞中的含量極低,而金屬標簽與細胞組分的非特異性結合能力極低,所以信號的背景極低。
目前用來標記抗體的金屬標簽有30多種,隨著技術進步,更多元素可以用來作為標簽,種類會進一步增加。

第四、多樣化的數(shù)據(jù)處理方式,實現(xiàn)對樣品的深入分析。
質譜流式細胞儀通道數(shù)量的激增帶來信息量的成倍增長。傳統(tǒng)的流式分析方法已經不能完全滿足需要,所以需要對數(shù)據(jù)進行各種降維處理,提取出其中包含的有用的生物學信息。常用的分析方法有:SPADE、PCA、viSNE以及Gemstone等。

應用領域:
質譜流式細胞技術可以實現(xiàn)對細胞群體進行精準的免疫分型,對細胞內信號傳導網(wǎng)絡進行全面的分析,分析細胞亞群之間的功能聯(lián)系,以及對于大量樣品的高通量多參數(shù)檢測。在造血、免疫、干細胞、癌癥以及藥物篩選等多個領域的研究有著廣泛的應用前景。



通過對13個核心表面抗原和18個輔助抗原表達情況的分析,對人骨髓細胞群進行高精度的分型,全景展示了骨髓各系不同分化階段細胞的具體組成。

發(fā)展現(xiàn)狀:
這項技術發(fā)展很快,商品化的儀器已經發(fā)展到第二代(CyTOF2)了。其生產商是美國一家叫DVS Sciences的公司,2014年2月被Fluidigm并購。隨著新資金的注入,北京東勝創(chuàng)新生物科技有限公司分子影像部率先引進中國并目前唯一擁有代理授權,利用公司遍布全國的營銷渠道和服務網(wǎng)絡、專業(yè)的技術服務團隊為此項技術努力的推廣中,為生命科學領域帶來新的技術與希望,后期這項技術與產品服務將會為大家?guī)砀嗟母@?BR>
相關公司:東勝創(chuàng)新生物科技有限公司
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