新品發(fā)布:SmartFlare RNA"靈光"活細胞RNA檢測納米技術
瀏覽次數(shù):4258 發(fā)布日期:2013-7-18
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突破性的納米創(chuàng)新技術,開辟RNA研究新時代!
- 無需樣本制備
- 無需 RNA 擴增
- 無需轉染試劑
- 無需細胞裂解
- 無毒性
只要一步孵育即可直接檢測活細胞內的RNA!檢測完成后,探針可以從細胞中排出,細胞仍可用于下游實驗分析!
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SmartFlare™ RNA“靈光”技術原理:
每個SmartFlare™探針都是一個納米金顆粒上面連接著多拷貝的雙鏈寡核苷酸序列,其中一條鏈(“報告鏈”)帶有熒光集團,靠近納米金顆粒時,熒光淬滅。當目標RNA與納米金顆粒上的“捕獲鏈“結合時,“報告鏈”被釋放,上面的熒光基團會發(fā)出熒光,通過熒光檢測平臺檢測到。
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活細胞RNA檢測納米技術原理視頻:
SmartFlare™ RNA“靈光”應用舉例:
1) 利用胞內的RNA標志物進行細胞分選,分選后的細胞仍可用于下游研究。
以miR-155為標志物進行細胞篩選:用10 ng/mL of TNF alpha 刺激miR-155高表達和低表達的細胞6小時,然后用VCAM 抗體進行標記,并用流式細胞儀進行分析。
A. miR-155低表達的細胞經過TNF alpha刺激后,VCAM標記沒有明顯的增加。
B. miR-155高表達的細胞經過TNF alpha刺激后,VCAM標記有明顯的上調。
C. 將TNF alpha 刺激的miR-155低表達和高表達細胞結果重疊,顯示MFI值有8.7倍的升高。
以miR-155為標志物篩選的細胞用TNF-alpha處理,然后用VCAM 抗體標記并用流式細胞儀檢測(點擊放大)
2) 用流式細胞儀進行RNA定量
利用SmartFlare™技術檢測HeLa和MCF-7細胞中EGFR的mRNA水平及HUVEC和HT1376細胞中FGF2的mRNA水平,結果顯示出與定量RT-PCR很好的相關性。
SmartFlare™檢測mRNA水平和RT-PCR結果的相關性(點擊放大)
3) 及時觀察活細胞中目標RNA的表達:
利用EGFR特異的SmartFlare RNA“靈光”顯示MCF7和HeLa細胞中EGFR的表達量不同(紅色)
利用無規(guī)則序列的對照探針進行實驗,在細胞中看不到任何信號(左邊兩幅圖)。
顯微鏡顯示EGFR SmartFlare RNA“靈光”的特異性和動力學范圍
SmartFlare™ RNA“靈光”還可以對miRNAs進行定量檢測,同時檢測多個目標RNA,在同一細胞樣本中對 RNA 和蛋白進行同時檢測。
更多的應用期待您的探索!
歡迎參加2013默克密理博生物科學新品發(fā)布會(北京站,上海站),了解更多SmartFlare"靈光"特色應用,點擊此處>>
SmartFlare™ 技術兼容的熒光檢測平臺:
- FlowSight® 多維全景流式細胞儀
- ImageStreamx MarkII 量化成像分析流式細胞儀
- Guava® easyCyte系列微毛細管細胞分析平臺
- Muse™ 智能觸控細胞分析儀
- CellASIC™ 微流控細胞芯片實驗室
更多應用及技術詳情請參考:
www.merckmillipore.com/smartflare
技術咨詢熱線:400-889-1988
Email: asiatechserv@merckgroup.com