9999元構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株
百恩維生物提供兩種篩選穩(wěn)定細胞株的方法:
1、轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩(wěn)定細胞系。
2、慢病毒感染篩選穩(wěn)定細胞株。
病毒感染方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩(wěn)定細胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株,由于其高效整合、高效轉(zhuǎn)錄、高效表達、宿主范圍廣,感染效率高,且與細胞染色體整合而不發(fā)生基因重排,是制備穩(wěn)定細胞株的理想載體。
百恩維有著多年構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的經(jīng)驗,已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad 、GIST-T1、HEK293、293T等多個種屬細胞中成功構(gòu)建過表達和RNAi穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株。
實例:
HMSC-ad穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株 SiHa穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株
產(chǎn)品特點:
1、穩(wěn)定:保證15代以內(nèi)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞穩(wěn)定表達。
2、迅速:一般控制在1個月以內(nèi)完成構(gòu)建。
3、經(jīng)濟:價格實惠,性價比高。
4、質(zhì)量保證:對外源基因進行嚴格鑒定。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株服務流程
1、篩選濃度測定:以 10-14 天細胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
2、細胞接種:轉(zhuǎn)染實驗前天接種細胞,各種細胞的平板密度依據(jù)各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉(zhuǎn)染當天細胞應達到 60%-80% 覆蓋。
3、細胞轉(zhuǎn)染:用構(gòu)建好的載體(或包裝好的病毒)轉(zhuǎn)染目的細胞。
4、抗生素篩選。
5、鑒定篩選結(jié)果。
客戶需要提供
1、構(gòu)建好的外源基因載體(如果您還沒有外源基因及載體,可以選用百恩維的載體構(gòu)建服務。)。
2、待轉(zhuǎn)染的細胞系( 1×106 個細胞,可傳代,倍增時間小于 48 小時),特殊細胞需提供培養(yǎng)基。
3、關于細胞培養(yǎng)條件的說明。
我們提供
1、構(gòu)建好的穩(wěn)定細胞株。
2、構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株實驗報告。
相關技術(shù)服務及產(chǎn)品:
病毒包裝
蛋白表達與純化
轉(zhuǎn)染試劑