在生命科學(xué)領(lǐng)域,隨著科研水平和實(shí)驗(yàn)手段不斷的提高,熒光染色方法以其特異性強(qiáng),使用相對(duì)于放射性元素更安全,檢測越來越靈敏等特點(diǎn),受到越來越多的研究人員的認(rèn)可,并且在實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用,成為經(jīng)常性的實(shí)驗(yàn)方法。
檢測熒光方法和手段根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求和目的也多種多樣,使用最多的還是熒光顯微鏡,熒光酶標(biāo)儀,流式細(xì)胞儀等。但是,無論何種儀器,無論儀器的性能如何,要得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),最基本的條件就是根據(jù)所使用的熒光染料正確設(shè)置激發(fā)和發(fā)射波長。
要選擇合適的熒光激發(fā)塊,首先要知道熒光染料激發(fā)和發(fā)射光的波長特性和激發(fā)塊光譜的各項(xiàng)數(shù)據(jù)。但是,熒光染料和濾色片的種類非常多,用戶往往沒有渠道來獲取這些信息。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中使用熒光顯微鏡時(shí),因?yàn)闊晒饧ぐl(fā)塊配置錯(cuò)誤而得不到好的觀察效果的現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生,對(duì)于用戶來說是一件非常煩惱的事。
為了方便用戶正確選擇激發(fā)和發(fā)射波長,節(jié)省時(shí)間,
日本理化研究所腦科學(xué)所-奧林巴斯合作中心(the RIKEN BSI-Olympus Collaboration Center )開發(fā)了軟件
Spectrum Manager。用戶選擇熒光染料,軟件會(huì)給出染料的光譜信息和推薦的濾色片選擇等信息,使用非常方便。
軟件界面
還可利用Data Manager自行對(duì)光源信息、染料數(shù)據(jù)庫或?yàn)V色片信息進(jìn)行更新。
軟件界面
此款軟件已經(jīng)整合至奧林巴斯共聚焦顯微鏡的一款軟件中,發(fā)布以來得到了用戶非常好的反響。因此,現(xiàn)將該軟件開放給所有顯微鏡使用者,供大家免費(fèi)使用。
由于是針對(duì)共聚焦顯微鏡的軟件,所以軟件中僅提供了激光光源譜線。如果您有需要,也可以將汞燈和氙燈光源信息導(dǎo)入至軟件。
以下提供普通熒光顯微鏡常用的汞燈和氙燈光源的圖譜,供大家參考。
汞燈光譜
汞燈在313, 334, 365, 406, 435, 546, and 578nm有比較好的激發(fā)峰。
氙燈光譜
氙燈在可見光光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度更穩(wěn)定(沒有像汞燈那樣的光譜峰值),在紅外波段比汞燈強(qiáng)度高。但在紫外波段有一定的缺陷性。
所以選擇光源時(shí),光源特性要與我們的具體應(yīng)用相匹配。
日本理化研究所腦科學(xué)所-奧林巴斯合作中心(the RIKEN BSI-Olympus Collaboration Center)于2007年6月1日正式成立。新中心成立基于生命科學(xué)中長期的發(fā)展方向,分享討論科研成果和資源,推動(dòng)生命科學(xué)的進(jìn)步和發(fā)展。同時(shí),中心的成立,也建立了科研成果到企業(yè)轉(zhuǎn)化的接力區(qū),使更多的科研人員能夠享受到研究成果。
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