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SmartCycler II : 真正“聰明”的定量PCR儀

瀏覽次數(shù):6216 發(fā)布日期:2009-3-25  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請注明出處

SmartCycler II是世界上獨一無二的能勝任多任務(wù)平行操作的定量PCR儀。她有方正的外觀,小巧的配件,精致的薄壁管,一切一切都是如此的出挑,甚至連為她專門優(yōu)化的試劑都彰顯著與眾不同——那居然是一顆顆躍動的小珠!


與其它常見的定量PCR儀不同,SmartCycler II在設(shè)計上更為合理與體貼。相信我們大多數(shù)人都碰到過這樣的苦惱:實驗室里幾個研究人員,不同的課題都需要使用儀器,有時就不得不犧牲一下自己的實驗安排和進(jìn)度了。而SmartCycler II就可以完全解決這樣的麻煩。她采用16個I-CORE模塊(圖2)的設(shè)計,每個模塊都集成有自己的加熱/冷卻系統(tǒng)以及光學(xué)信號激發(fā)與檢測系統(tǒng),每個模塊都可以獨立的操控和運行,因此一臺SmartCycler II其實就相當(dāng)于16臺獨立的定量PCR儀。不同實驗條件的樣品可以在一臺儀器上同時擴(kuò)增,也可以在一組樣品的實驗過程中,隨時在其它空置的模塊上開始運行其它的實驗。這樣的設(shè)計,保證了儀器能夠被最高效的使用,而且,由于一套控溫系統(tǒng)只服務(wù)于一只反應(yīng)管,因此升降溫速度都非?欤荷郎厮俣瓤蛇_(dá)10℃/s,降溫也達(dá)到了2.5℃/s,通常要大約2小時才能完成的一輪45個循壞的兩步法定量PCR實驗,在SmartCycler II上只需要45分鐘就夠了。多任務(wù)操作的靈活性結(jié)合系統(tǒng)的快速,賦予了SmartCycler II更高的有效通量,也保證了儀器能夠得到最充分的使用。

這種靈活性在我們優(yōu)化實驗條件時更顯得重要。舉個簡單的例子,在以前,如果我們對退火溫度和時間各做4個梯度,就需要16輪2小時的實驗后才能匯總所有的結(jié)果進(jìn)行比較,現(xiàn)在有了SmartCycler II,只需不到一個小時!而一個實驗的條件優(yōu)化,往往還牽涉到反應(yīng)體系中引物及探針(或染料)的濃度選擇等等,林林總總,SmartCycler II可以為我們節(jié)約多少寶貴的時間!

而且,SmartCycler II的靈活性及快速,是建立在保證實驗數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和盡可能寬的線性范圍的基礎(chǔ)之上的。獨立的模塊式設(shè)計,使得系統(tǒng)中反應(yīng)管的實際溫度,只受一個因素的影響,即模塊的控溫精度(<±0.5℃);而傳統(tǒng)的板式設(shè)計,除了整塊板的控溫精度之外,還必須考慮一塊樣品板上不同位置之間的差異,即我們通常所說的“邊緣效應(yīng)”。因此,除了個別離心式設(shè)計的系統(tǒng)之外,SmartCycler II的實驗重復(fù)性表現(xiàn),不遜于其它任何系統(tǒng)。不妨讓我們來看看實際的實驗數(shù)據(jù)吧:用TxR/BHQ2標(biāo)記的探針對一段71bp的DNA片段進(jìn)行定量的結(jié)果,9組樣品從109個拷貝到10個拷貝,以10倍為一個梯度,每一個梯度做3次重復(fù),圖3顯示的就是實驗的結(jié)果。我們可以看到,每一個梯度的3次重復(fù)結(jié)果都相互吻合得非常好(Cv<0.55%),而且在數(shù)量及這樣一個很寬的線性范圍內(nèi),都可以獲得線性很好的數(shù)據(jù)(標(biāo)準(zhǔn)曲線的r2>0.99)。


SmartCycler II之所以能夠達(dá)到9個數(shù)量級的線性監(jiān)測范圍,源于高性能的光學(xué)系統(tǒng)。每一個獨立的I-CORE中,都整合有4個不同波長的LED激發(fā)光源和4個相應(yīng)波長的光電檢測器,經(jīng)過系統(tǒng)優(yōu)化,可以有效的進(jìn)行光譜分離。4通道的設(shè)計,使得我們在實驗設(shè)計過程中可以自由的選擇合適的熒光染料,無論是成本低廉的SYBR Green,還是特異性更好的TaqMan或分子信標(biāo)探針,都可以使用;還可以選擇多重定量實驗,對于經(jīng)常需要做相對定量的您而言,是不是非常方便呢?

SmartCycler II的軟件操作也非常方便,三級菜單設(shè)計,簡單明了,即便是初學(xué)者,不消一個小時也可以熟練操作了。而且,SmartCycler II的全固件設(shè)計,使它擁有了極好的抗震性能,不但能夠?qū)崟r,甚至還能夠完成實地定量,因此,推出短短時間,就在疾病預(yù)防和控制,農(nóng)林畜牧業(yè)的病蟲害防治以及生物反恐等領(lǐng)域大放異彩。系統(tǒng)的通量可以非常容易的擴(kuò)展到96個樣品,在科研領(lǐng)域也得到了廣泛的認(rèn)可。Cepheid公司出品的SmartCycler II已成為目前全美市場年銷量第三的著名品牌。

心動不如行動!快來和我們一起加入 “聰明”定量之旅,共同享受SmartCycler II帶來的實驗樂趣吧!

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