可以允許應(yīng)用塑料培養(yǎng)皿的偏振光微分干涉技術(shù)
PlasDIC—在顯微細(xì)胞學(xué)中令人折服的創(chuàng)舉

目前現(xiàn)狀在顯微細(xì)胞學(xué)日常的工作中我們常常遇到厚樣品和活動(dòng)樣品的觀察問(wèn)題，尤其是在用相差觀察厚的物體時(shí)問(wèn)題更為突出，重所周知在這種觀察條件時(shí)只能得到帶“光暈”的圖象信息。
Nomarski DIC(微分干涉)技術(shù)可以對(duì)付細(xì)胞團(tuán)或者組織等較厚的樣品，但它是昂貴的并且僅僅只能應(yīng)用在玻璃底的培養(yǎng)皿中，當(dāng)然這種技術(shù)在日常應(yīng)用中最大的問(wèn)題還是景深不足。
另外一些技術(shù)也可以用于厚樣品的觀察，例如基于斜照明原理的Hoffmann技術(shù)，不過(guò)這種技術(shù)調(diào)節(jié)十分困難并且存在測(cè)量誤差。

來(lái)自ZEISS公司的PlasDIC技術(shù)
與現(xiàn)在的透射光干涉技術(shù)不同，PlasDIC技術(shù)無(wú)需在聚光鏡中裝補(bǔ)償棱鏡，因此樣本是被自然光（例如非偏振光）照射；只有當(dāng)經(jīng)過(guò)DIC 棱鏡之后的光才產(chǎn)生偏振，接著檢偏器讓通過(guò)的光線在樣品平面產(chǎn)生振動(dòng)并干涉；當(dāng)聚光鏡上狹縫光闌設(shè)定在λ/4，將呈現(xiàn)清晰的干涉圖象；這種對(duì)比是可以變量調(diào)節(jié)的（它可以根據(jù)相應(yīng)的物體而變化）。這在顯微鏡學(xué)中是首次相干和偏振的完美組合，它將整個(gè)樣品區(qū)域的位置置于偏光敏感區(qū)域之外；PlasDIC技術(shù)也是第一個(gè)允許應(yīng)用塑料培養(yǎng)皿的偏振光微分干涉技術(shù)。
結(jié)果和評(píng)估

下圖中顯示的是相同區(qū)域的HEK（人胚腎）細(xì)胞在相差（左）和 PlasDIC技術(shù)（右）的觀察效果。我們能夠清楚的看到使用相差觀察時(shí)，由于“光暈”現(xiàn)象，細(xì)胞較厚的區(qū)域的重現(xiàn)性是十分糟糕的；而如果在圖象中有超過(guò)85%以上的區(qū)域?yàn)檩^厚細(xì)胞時(shí)這個(gè)問(wèn)題將非常嚴(yán)重。而圖2右中使用PlasDIC技術(shù)，不管觀察區(qū)域樣品是薄還是厚都可以得到漂亮重現(xiàn)的影象，并產(chǎn)生浮雕效果；因此可以得到更重要的細(xì)節(jié)特征。
結(jié)論：
A． 因?yàn)闊o(wú)須調(diào)中和變換光闌，使用PlasDIC技術(shù)的顯微鏡操作也更加方便，所以也不容易出錯(cuò)。
B． 它僅使用標(biāo)準(zhǔn)的物鏡，在聚光鏡上也不需要棱鏡，有更高性價(jià)比。
C． 不需要使用帶玻璃底的塑料培養(yǎng)皿，普通塑料培養(yǎng)皿即可。
所有以上諸點(diǎn)說(shuō)明，PlasDIC技術(shù)活細(xì)胞顯微觀察的最佳工具。

ZEISS 倒置顯微鏡都可以應(yīng)用這個(gè)新技術(shù).歡迎咨詢:

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